Caspase 7抑制剂200ul使用说明书实验操作步骤:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量为 1mL ,其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推;对于细胞悬液每50~100 万细胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取适量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超纯水的比例稀释JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色缓冲液(5 ×),混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、阳性对照的设置:
把试剂盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到细胞培养液中,稀释至10uM ,处理细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ,进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞,通常10uM CCCP处理 20 分钟后线粒体的膜电位会*丧失,JC-1 染色后观察应呈绿色荧光;而正常的细胞经JC-1 染色后应显示红色荧光。对于特定的细胞,CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同,需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞:
(1)取 10~60 万细胞,重悬于 0.5mL 细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中 37 ℃孵育20 分钟。
(3)在孵育期间,按照每 1mL JC-1 染色缓冲液(5×)加入 4mL 蒸馏水的比例,配制适量的JC-1 染色缓冲液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育结束后,600g 4 ℃离心3 ~4 分钟,沉淀细胞。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。
(5)用JC-1 染色缓冲液(1×)洗涤 2 次:加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。再加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心 3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。
(6)再用适量 JC-1 染色缓冲液(1×)重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
Caspase 7抑制剂200ul使用说明书注意事项
(1)本试剂只适用于实验,不适用于临床检测;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙锭)有毒性,能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用,使用时需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。在处理和标记时,尽可能在暗处进行。在孵育阶段,用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后,在暗室内用显微镜观察;
(4)整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作,以免影响细胞状态。
(5)在细胞洗涤的后一步,请尽量将上清弃净,以免PBS残留,有可能会影响实验结果。
(6)为防止荧光衰变,宜在1小时内进行流式检测。
(7)PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,建议首*行Annexin V-FITC染色,短可在上机前5分钟再加入PI染色。
CaES-17(人食管癌细胞) 5×106cells/瓶×2
CM-M053小鼠卵巢上皮细胞*培养基100mL
PLBD2 Others Human 人 PLBD2 人细胞裂解液 (阳性对照)
CaEs-17细胞,人食管癌细胞 人脑瘤细胞,SF767细胞 叙利亚仓鼠肌肉细胞;GH-M1
小鼠结缔组织L细胞株929克隆;L-929 [L929]
CD55 Others Human 人 CD55 / DAF 人细胞裂解液 (阳性对照)
CL-0242Vero(非洲绿猴肾细胞)5×106cells/瓶×2
IL17RB Others Human 人 IL17BR / IL17RB / IL-17 Receptor B 人细胞裂解液 (阳性对照)
人支气管平滑肌细胞cDNAHBSMC cDNA
小型猪肾细胞;MPK 畸胎癌细胞,P19细胞 W256细胞,Walker氏癌肉瘤256瘤株
Sars结构蛋白表达株;293 001A
HA Others H5N3 甲型流感 H5N3 (A/duck/Hokkaido/167/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照)
PADI4 Others Human 人 PAD4 / PADI4 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
前脂肪细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
615小鼠癌瘤株;Ca763
MC3T3-E1 Subclone 14细胞,小鼠原成骨细胞 人肝癌细胞系,LM-6细胞 CL-0112HMy2.CIR(人B淋巴母细胞)5×106cells/瓶×2
中国仓鼠肺细胞;CHL
TNFRSF1A Others Human 人 TNFRSF1A / TNFRI / CD120a 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人血清剥夺反应相关蛋白(SDPR)免疫试剂盒 Human SDPR ELISA Kit
人抗红细胞抗体(RBC)ELISA试剂盒 ,英文名: RBC ELISA Kit
RatInterferonα,IFN-αELISA试剂盒大鼠α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Humangastrin-reliasingpeptide,GRPELISA试剂盒人胃泌素释放多肽(GRP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanInterleukin12,IL-12/P70ELISAKit人白介素12(IL-12/P70)ELISA试剂盒规格:96T/48T
小鼠骨保护素配体(OPGL)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human orexin / orexin B (OX-B) ELISA Kit 人食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA试剂盒
Humanpancreatickininogenase,PKELISAKit 人*(PK)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanAnti-Saccharomycescerevisiaeantibody,ASCAELISA试剂盒人抗酿酒酵母抗体(ASCA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
植物细胞周期S后期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒10次
HumanTrypsinogen-2,Try-ⅡELISAKit人*原Ⅱ(Try-Ⅱ)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Caspase 7抑制剂200ul使用说明书小鼠DNA甲基转移酶1(DNMT1)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠C型钠尿肽(CNP)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠C肽(C-Peptide)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
我司Caspase 7抑制剂200ul使用说明书本着标准*、质量*、服务*、信誉*的宗旨,为客户提供轻松便捷,安全可靠的网上采购模式!我们将竭诚为您服务,咨询!