封闭用脱脂奶粉50g使用说明书实验操作步骤:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量为 1mL ,其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推;对于细胞悬液每50~100 万细胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取适量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超纯水的比例稀释JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色缓冲液(5 ×),混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、阳性对照的设置:
把试剂盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到细胞培养液中,稀释至10uM ,处理细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ,进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞,通常10uM CCCP处理 20 分钟后线粒体的膜电位会*丧失,JC-1 染色后观察应呈绿色荧光;而正常的细胞经JC-1 染色后应显示红色荧光。对于特定的细胞,CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同,需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞:
(1)取 10~60 万细胞,重悬于 0.5mL 细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中 37 ℃孵育20 分钟。
(3)在孵育期间,按照每 1mL JC-1 染色缓冲液(5×)加入 4mL 蒸馏水的比例,配制适量的JC-1 染色缓冲液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育结束后,600g 4 ℃离心3 ~4 分钟,沉淀细胞。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。
(5)用JC-1 染色缓冲液(1×)洗涤 2 次:加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。再加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心 3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。
(6)再用适量 JC-1 染色缓冲液(1×)重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
封闭用脱脂奶粉50g使用说明书注意事项
(1)本试剂只适用于实验,不适用于临床检测;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙锭)有毒性,能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用,使用时需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。在处理和标记时,尽可能在暗处进行。在孵育阶段,用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后,在暗室内用显微镜观察;
(4)整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作,以免影响细胞状态。
(5)在细胞洗涤的后一步,请尽量将上清弃净,以免PBS残留,有可能会影响实验结果。
(6)为防止荧光衰变,宜在1小时内进行流式检测。
(7)PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,建议首*行Annexin V-FITC染色,短可在上机前5分钟再加入PI染色。
IL8 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IL-8 / CXCL8 蛋白
人甲状腺滤泡上皮细胞*培养基 100mL
CD70 Others Rat 大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 人细胞裂解液 (阳性对照)
HA细胞,人羊膜细胞 产气肠杆菌 中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS3
tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);P19-CAG-tTA-3C3
NCI-H1650(人非小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H2N2 (A/Guiyang/1/1957) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照)
猪晶状体上皮细胞PlEpiC
EGFR Others Rat 大鼠 EGFR / HER1 / ErbB1 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠腮腺细胞*培养基 100mL
NCI-H23人非小细胞肺癌细胞 NCI-H23 cells in human non small cell lung cancer 1640+10%FBS
NRG1 Protein Human 重组人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD, Fc 标签)
PATU8988(人胰腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 视网膜muller细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
NA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 神经氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人细胞裂解液 (阳性对照)
人浸润性导管癌旁皮肤细胞;CCD-1095Sk
CL-0319B16-F10(小鼠皮肤黑色素瘤细胞)5×106cells/瓶×2
RAW264.7细胞,单核细胞-巨噬细胞 人单核细胞白血病细胞,THP-1细胞 EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0923
293A (人胚肾细胞) 5×106cells/瓶×2
FCGR3A Others Human 人 CD16a / FCGR3A 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠Ⅱ型前胶原羧基端原肽(PⅡCP)ELISA试剂盒 ,英文名: PⅡCP ELISA Kit
人胎盘蛋白(PP)ELISA检测试剂盒Humanplacentalprotein,PPELISAKit 96T/48T
大鼠泛素连接酶(E3/UBPL)免疫试剂盒 Rat E3/ubiquitin-protein ligase,E3/UBPL ELISA Kit
CLIAKitforUGCG(HumanUDP-glucoseceramideglucosyltransferase)ELISAKit人尿苷二磷酸葡萄糖神经酰胺葡萄糖基转移酶规格:48T/96T
尿液一氧化氮合成酶总活性比色法定量检测试剂盒20次
ELISAKitsTNF-R1人可溶性肿瘤坏死因子受体1规格:48T/96T
兔抗单核细胞抗体(AMA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human Elongin (Elongin) ELISA Kit 人延伸蛋白(elongin)ELISA试剂盒
Humananti-rubellavirusIgMantibody,anti-RVIgMELISAKit 人抗风疹病毒IgM抗体(anti-RVIgM)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanGlucosedependentinsulinreleasingpolypeptide,GIPELISA试剂盒人葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织沉默调节蛋白3(SIRT3)活性比色法定量检测试剂盒20次
Humanmultidrugresistance-associatedprotein,MRPELISAKit人多药耐药相关蛋白(MRP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
封闭用脱脂奶粉50g使用说明书鸡碳酸酐酶(CA)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
鸡瘦素(LEP)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
鸡生长因子(GH)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
鸡上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
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