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TIMP-1(Human tissue inhibitors of metalloproteinase
中文名称：RAR激动剂(AGN194310)
英文名称：AGN 194310
产品规格：1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg
货号：FS-X10855
产品介绍:
AGN194310(VTP-194310)是RAR激动剂，对RARα/β/γ的Kd分别为3/2/5nM。 注：本品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他用途！ 号：229961-45-9 别名：VTP-194310 纯度：98.26% 分子量：424.55 储存条件：-20℃，有效期2年，溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。 |
培养操作步骤：
1．公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验报告：
一、分离与培养： 1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小； 2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置； 3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化； 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养； 5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养； | 二、免疫荧光鉴定： 1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min； 2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min； 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜； 5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h； 6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
金耳人基质金属蛋白抑制因子2Anti-PPP3CB Antibody人Bκ 轻肽基因增强子核因子抑制因子ε(Nfkbie)
变异短波单胞菌小鼠组蛋白H2bAnti-PPP4R2 Antibody人Bκ 轻肽基因增强子核因子抑制因子ε(Nfkbie)
橄榄色盘多毛孢大鼠激M2型同工Anti-PPP4R1L Antibody人ADAM金属肽含血小板反应蛋白1基元4(ADAMTS4)
粪链球菌人抑瘤MAnti-PPP2R3C Antibody人ADAM金属肽含血小板反应蛋白1基元4(ADAMTS4)
羊肚菌小鼠血管内皮粘附分子1Anti-PRDM1 Antibody人类似RIKEN cDNA 4933429F08 基因
黑曲霉小鼠糖皮质类固受体Anti-PRAF2 Antibody人类似RIKEN cDNA 4933429F08 基因
中国台湾根霉人肺表面活性物质相关蛋白DAnti-PRDM1 Antibody人孕和adipoQ受体家族成员Ⅶ(PAQR7)
长双歧杆菌长亚种大鼠γ基丁Anti-PPRC1 Antibody人孕和adipoQ受体家族成员Ⅶ(PAQR7)
细孢毛霉小鼠黄体生成释放激Anti-PRDM12 Antibody人集蛋白亚家族成员11(COLEC11)
大肠杆菌大鼠5羟色Anti-PRIM1 Antibody人集蛋白亚家族成员11(COLEC11)
真姬菇人肺表面活性物质相关蛋白CAnti-PRIM1 Antibody人丝蛋白抑制因子肽抑制因子进化枝3G(Serpina3g)
紫色链霉菌人肺表面活性物质相关蛋白BAnti-PRKACA Antibody人丝蛋白抑制因子肽抑制因子进化枝3G(Serpina3g)
费希尔曲霉大鼠P物质受体Anti-PRIM1 Antibody人类似RIKEN cDNA A630077B13 基因
产气荚膜梭菌 A型小鼠脑红蛋白Anti-PRKACB Antibody人类似RIKEN cDNA A630077B13 基因
芸薹生链格孢人表面活性蛋白AAnti-PRKAG2 Antibody人类似RIKEN cDNA 31050K21 基因
皱褶青霉小鼠8异前列腺Anti-PRKACG Antibody人类似RIKEN cDNA 31050K21 基因
扭转原肠胚形成同源蛋白1抗体黑根须腹菌人组织细胞淋巴瘤细胞
蛋白酪磷样N前体蛋白抗体正红菇猫淋巴瘤细胞
TUB蛋白抗体馨生棒孢LC-2/ad 人肺腺癌细胞
味觉受体蛋白家族2亚基16抗体麦斑点附球霉KPL-4 人乳腺癌细胞
RAR激动剂(AGN194310)盐古杆 厌氧琼脂乙酰CoA羧化
侧耳 梭鉴别琼脂（DCA）异柠檬脱氢
耐寒短杆 强化梭鉴别琼脂（DRCA）硬脂酰去饱和1
紫色红曲 强化梭琼脂游离血红蛋白
短乳杆 3-氨基吡-2-甲甲酯游离脂肪
乳酒假丝酵母 强化梭培养基（RCM）
盐沼盐杆 TSN琼脂孕酮
同合小克银汉霉 2-甲氧基吡啶粘蛋白2
运动节杆 2-乙基磺酰脂蛋白磷脂A2
豇豆慢生根瘤 2-吡啶乙盐盐脂蛋白脂
花楸盘多毛孢 11-溴-1-十一脂多糖;内
灵芝(红芝，赤芝) 4-肉桂脂肪
隆氏针层孔 二甲橙二钠盐脂肪合成
酿酒酵母 亚硫铁琼脂中性粒弹性蛋白
肠沙门氏肠亚种迈阿密血清型 TBB培养基肿瘤坏死因子α
