海洋微生物菌种标本的采纳和保留2018/06/25

海洋微生物菌种标本的采纳和保留可用作豚鼠elisa试剂盒测定的标本非常广泛，体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、大便)等均可作标本以测定其间某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液)，有些则需经预处理(如大便和某些分泌物)。大多数豚鼠ELISA试剂盒检查均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外，别的成份均平等于血清。制备血浆标本需借助于抗凝剂，而血清标本只需待血清自然凝结、收缩后即可获得。除特殊情况外，在医学查验中均以血清作为检查标本。在豚鼠ELISA试剂盒

海洋微生物菌种处理植物样本步骤2018/06/22

海洋微生物菌种处理植物样本步骤1.称取的组织重量不能低于50mg。2.匀浆的比例按照10%，即1g组织加9ml的匀浆液，匀浆液一般选取PBS(PH=7.2-7.4)3.组织在匀浆器匀浆过程中，匀浆液应该分2次加进去，这样匀浆更充分。4.充分匀浆完成后离心取上清，离心机的转数选取2000-3000转每分，转数不宜超过5000.离心时间为15-30分钟。心法应该如何操作检测方法详细解析1.双抗体夹心法测抗原针对抗原分子上两个不同抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相抗体和酶标抗体。适用于测定二价或二价以

林业菌种提示您血清操作误区2018/06/15

林业菌种实验内标法的操作：①将已知量的内标样加入标准样品，制成混合标样，并配制一系列的已知浓度的工作标样。混合标样中标样与内标样的摩尔比不变。②注入色谱柱，以（标样峰面积/内标样峰面积）为响应值。③根据响应值与工作标样浓度之间存在的线性关系，即W=f×A，制成标准曲线。④将已知量的内标样加入未知样品，注入色谱柱，得到欲测组分的响应值。⑤根据已知的系数f，即可求出欲测组分的浓度。提示您血清操作误区：1、解冻血清不随时摇晃均匀，使温度及成分均一。2、在没有特别的要求下，还坚持要做热灭活。3、直接由-

生物菌种样本加样的经验分享2018/06/11

生物菌种样本加样的经验分享1.细胞上清：前处理必须是细胞离心去除，每孔直接加100μl即可。如果浓度太高需稀释时，用标准品稀释液直接稀释。2.脑脊液：前处理必须是细胞离心去除，每孔直接加100μl即可。如果浓度太高需稀释时，用标准品稀释液直接稀释。3.血清血浆：请加入50ul样本分析缓冲液后加50ul标本,如稀释量大，请将样本与样本分析缓冲液等量加入，不足部分用标准品稀释液补充至100ul。A血清标本应是自然凝固后，取上清，避免在冰箱中凝固血液；B血浆标本，推荐用EDTA的方法收集若待测样本不能

海洋微生物菌种实验的技术手段和实验前准备2018/06/08

海洋微生物菌种实验的技术手段和实验前准备1、其抗原抗体反应具有高度的特异性。2、将酶催化反应的放大作用和抗原抗体亲和反应的高度专一性、特异性相结合，以酶标记的抗原或抗体作为主要试剂进行免疫测试，所以具有很高的灵敏度。3、实现了在细胞或亚细胞水平上示踪抗原或抗体的所在部位，或在微克、甚至纳克水平上对其进行定量。实验可以说是免疫学反应应用到科研出产中*为广泛*为敏捷的技术手段，那么它的实验前有什么需要准备的？按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。ELISA中用的蒸馏水或去离子水，包括用于洗涤的，

林业菌种实验准备的过程2018/06/06

林业菌种实验准备的过程1、酶标仪：经常维护其光学部分，防止滤光片霉变，ELISA试剂盒定期检测校正，使其保持良好的工作性能。2、洗板机：每个厂家设置洗板后的残留液有各自的规定一般不超过2ul，人工扣板时，垫纸不湿，定期检查管孔是否堵塞。3、一般酶标仪无585nm滤光片，可选用550nm或630nm滤光片，450nm滤光片的检定选用普鲁兰溶液（校正波长为630nm）。使用酶标仪后操作规范：1、使用移液器加液，移液枪头不能混用。2、洗板要干净，避免交叉污染。3、严格按照试剂盒的说明书操作，反应时间准

生物菌种样本的处理方式2018/06/04

生物菌种样本的处理方式:1、胃液、唾液、尿液的采集方式一般现采现用，胃液、唾液的采集时间是空腹采集，一般隔夜尿不采集；2、采集血清时，一般要加入总体积1%的抗凝剂，采集后先室温或4℃静置半小时后，800-1000rmpx5min分离，取上清，-20℃或4℃保存备用；3、组织提取液、肺泡灌洗液等，采集后离心分离，800-1000rmpx5min，取上清，-20℃或4℃保存备用；4、采集血浆时一般不加抗凝剂，采集后立即离心800-1000rmpx5min分离，取上清，-20℃或4℃保存备用；5、不贴

海洋微生物菌种样本的采纳和保存办法小结：2018/05/30

海洋微生物菌种样本的采纳和保存办法小结：的试剂，良好的仪器和的操作是保证ELISA试剂盒检测成果正确牢靠的必要条件。血清标本宜在新鲜时检测。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外，其他成份均同即是血清。如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会发作假阳性反应。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液)，有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。制备血浆标本需借助于抗凝剂，而血清标本只需待血清天然凝结、缩短后即可获得。大部分ELISA检测均以血清为标本。在ELISA中血浆和血清可对等使用。冻住血清融解后

林业菌种检验中的作用2018/05/28

林业菌种检验中的作用在一步法测定中，当标本中受检抗原的含量很高时，过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合，而不再形成"夹心复合物"。类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象，此时反应后显色的吸光值（位于抗原过剩带上）与标准曲线（位于抗体过剩带上）某一抗原浓度的吸光值相同，如按常法测读，所得结果将低于实际的含量，这种现象被称为钩状效应（hookeffect），因为标准曲线到达高峰后呈钩状弯落。钩状效应严重时，反应甚至可不显色而出现假阴性结果。因此在使用一步法试剂测定标本中含量可异常增高的物质（例如血清中H

林业菌种实验步骤及注意事项的资料2018/05/25

林业菌种实验步骤及注意事项的资料1.把聚丙烯酰胺凝胶中的蛋白质电泳转移到硝酸纤维膜上。1)转移缓冲液洗涤凝胶和硝酸纤维素膜，将硝酸纤维素膜铺在凝胶上，用5ml移液管在凝胶上来回滚动去除所有的气泡。2)在凝胶/滤膜外再包一张3mm滤纸(预先用转移缓冲液浸湿)，将凝胶夹在中间，保持湿润和没有气泡。3)将此滤纸/凝胶/薄膜滤纸按照厂家建议方法放入电泳装置中，凝胶面向阴极。4)将上述装置放入缓冲液槽中，并灌满转移缓冲液以淹没凝胶。5)按照厂家所示接通电源开始电泳转移。6)转移结束后，取出薄膜和凝胶，弃去

生物菌种实验前务必注意2018/05/23

生物菌种实验前务必注意1）仔细阅读说明书2）检查试剂盒标签上的有效期。如果超过有效期，请勿使用。3）按说明书确定所有试剂齐全（数量、体积）4）标本制备要规范，每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备（贮存），尽量分装做备份。短期内无法实验者，注意低温保存5）准备好所有实验额外所需物品，（比如移液器，试管，清洗器，酶标仪）6）按说明书将所用试剂平衡至室温，根据检测标本数量确定所需试剂的量7）检查试剂盒内每种试剂的贮存条件，保证所有试剂均按照试剂盒内说明书推荐的条件存储。8）检查不稳定或者变质的试剂

海洋微生物菌种基本原理是2018/05/21

海洋微生物菌种基本原理是:①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,zui后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。样本处理及要求:1、血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-300

林业菌种通用操作方法2018/05/16

林业菌种通用操作方法1.加规范品：在酶标包被板上设规范品孔，elisa试剂盒ELISA试剂盒依次参加不同浓度的规范品50ul(建议每个浓度做2个平行孔)人ELISA试剂盒。2.加样：别离设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其他各步操作一样)、待测样品孔。大鼠ELISA试剂盒在酶标包被板上待测样品孔中先加样品40μl，然后再加样品亲和素10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，elisa试剂盒悄悄晃动混匀人ELISA试剂盒。3.显色：每孔先参加显色剂A50μl，再参加显色剂B50μ

生物菌种检测样本中体液的处理方式2018/05/14

生物菌种检测样本中体液的处理方式1、采集血浆时一般不加抗凝剂（主要为枸橼酸盐和柠檬酸盐），采集后立即离心800-1000rmpx5min分离，取上清，-20℃或4℃保存备用；1.1、血液包括血浆和血清，它们的主要区别就是：血清凝血而血浆不凝血，所以它们的处理方式也就不一样1.2、如要采集血清，一般要加入总体积1%的抗凝剂，采集后先室温或4℃静置半小时后，800-1000rmpx5min分离，取上清，-20℃或4℃保存备用；2、胃液和唾液的采集方式一般现采现用，但是一般饭后半小时内不易采集，因为刚

海洋微生物菌种实验技术要点2018/05/09

海洋微生物菌种实验技术要点1.在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染，试剂避免受到微生物的污染，因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。2.小心吸取试剂并严格遵守给定的孵育时间和温度。请注意在吸取标本/标准品，酶结合物或底物时，个孔与*后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的“预孵育”时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。而且，洗涤不充分将影响试验结果。3.试剂盒保存：部分试剂保存于-20℃，部分试剂保存于2-8℃，具体以标签上的标示为准

林业菌种实验中背景因素的影响2018/05/02

林业菌种实验中背景因素的影响一、洗涤很重要洗涤步骤看似很无聊，其实很重要，因为如果未结合的材料(如非特异结合的抗体或检测试剂)残留在微孔板中，那么它会增加背景噪音。如有必要，可增加洗涤液中的盐浓度，这会阻止非特异结合反应。如果背景过高，而您怀疑洗涤不够时，可以尝试增加洗涤次数。二、封闭更关键封闭液的作用是让不相关的蛋白占据微孔板中潜在的结合位点。这就降低了可产生信号的抗体非特异结合的机会。您当然也希望抗体只与目的蛋白结合吧。如果您的背景过高，怀疑封闭不充分，那么您可以尝试使用更高浓度的封闭液，或

生物菌种检测夹心法2018/04/23

生物菌种检测夹心法一、原理采用两株识别不同表位的抗IL-8单克隆抗体，其中一株(4D7)作为包被抗体，以识别和结合待检标本中的Il-8,另一株作为酶标抗体，与结合于包被抗体的IL-8的另一个表位结合并催化底物显色。二、试剂器材1.试剂盒提供包被抗体、酶标抗体、标准品，底物(ABTS)、96孔elisa板。2.包被缓冲液、PBS、底物缓冲液配制同常规ELISA法。三、操作步骤：1.包被：pH9.5碳酸盐缓液稀释4D7单克隆抗体粗提γ球蛋白至1μg/ml,加入96孔板,100μl/孔，放4℃,36小

海洋微生物菌种技术中标本制作2018/04/18

海洋微生物菌种技术中标本制作1、不需要使用双氧水处理，封闭和一抗孵育与其相同。2、的二抗使用不同荧光标记的二抗孵育，孵育时间根据抗体的工作浓度确定。3、二抗孵育之后充分洗片后即可贴片、封片和观察。4、免疫荧光在封片时常使用封片剂或甘油：0.01MPBS（1：1）。条件许可，建议购买抗淬灭的封片液，使标本可以保存更久。5、的孵育以及后续处理需要避光。6、染色假阳性可能会多，需要分别设定阳性和阴性对照。注意事项1、染色后一般在1h内完成观察，或于4℃保存4h，时间过长，可能会使荧光提前衰退。2、每次

林业菌种实验中加样所遇到的问题解析2018/04/16

林业菌种实验中加样所遇到的问题解析测定现通常为采用手工操作的以微孔板条为固相的测定模式，测定操作非常简单，一般涉及到标本的收集保存、试剂准备、加样、温育、洗板、显色、比色、结果判断和结果报告及解释等方面，其中任一步骤的不当都会影响测定结果，且尤以加样、温育和洗板等步骤为甚。正确的加样方法应为45度，吸头贴着孔壁加入，应注意角度太小，会使液体残留在孔壁上，导致加样不准确；吸头应当贴着管壁和液面的交界处！目前临床上使用血清标本测定的标志物一般有传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物、激素、特种蛋白、细

生物菌种实验操作时的注意事项2018/04/09

生物菌种实验操作时的注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui