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实时荧光定量PCR荧光化学物质原理简述2024/5/20
实时荧光定量PCR所使用的荧光物质可分为两种：荧光探针和荧光染料。现将其原理简述如下：1.TaqMan荧光探针：PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标...
PCR反应引物纯化方式浅析2024/5/6
1、脱盐寡核苷酸合成后，为了纯化寡核苷酸成为天然的DNA结构，首先必须去除保护基团。通过浓氨水处理，合成的寡核苷酸从固相载体上分离，2-氰乙氧基--磷酸二脂键的保护基团，以及碱基的保护基团基（苯甲酰基...
细胞生长缓慢解析2024/4/28
细胞生长缓慢解析：1、培养基可能缺乏细胞生长所需的某种因子。通常情况下，当小伙伴购买细胞，并没有按照ATCC或国内细胞库的方法制备培养基，使用实验室兄弟姐妹使用的培养基来培养细胞。解决方法一般是按照的...
PCR反应中主要成份引物解读2024/4/22
PCR反应产物的特异性由一对上下游引物所决定。引物的好坏往往是PCR成败的关键。引物设计和选择目的DNA序列区域时可遵循下列原则：1、引物长度约为16-30bp，太短会降低退火温度影响引物与模板配对，...
ELISA试验温育过程详解2024/4/15
在ELISA试剂盒中一般有两次抗原抗体反应，即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间，这一保温过程称为温育，有人称之为孵育，在ELISA试剂盒中似不恰当。温育常采用的温度有43...
细胞培养技术包含的各方面总结2024/4/8
细胞培养技术是生物医学研究中一个基础且关键的技术，广泛应用于细胞生物学、药理学、遗传学、癌症研究等领域。一个全面的细胞培养技术总结应该包含以下几个方面：1.培养环境温度：大部分哺乳动物细胞在37°C下...
移液器操作规范与技巧2024/3/29
移液器的工作原理是活塞通过弹簧的伸缩运动来实现吸液和放液。在活塞推动下，排出部分空气，利用大气压吸入液体，再由活塞推动空气排出液体。使用移液器时，配合弹簧的伸缩性特点来操作，可以很好地控制移液的速度和...
支原体污染细胞常用清除方法2024/3/25
支原体污染细胞后，有必要清除支原体，常用方法有：1、对于非重要的细胞，如培养中的细胞、WCB的细胞等，将培养物与用过的培养基灭活后丢弃即可。对于较为重要的细胞，如来源珍贵或实验室中细胞保藏量较小等可以...
细胞培养实验基本操作步骤2024/3/18
细胞培养实验基本操作：1、进无菌室前要洗手，按规定穿隔离衣。开始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。2、操作者动作要轻，安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意...
PCR产物纯化效率提升考虑要素2024/3/11
PCR扩增完成后需要进行琼脂糖凝胶电泳检测，在条带单一无其他杂带的情况下，可以直接对产物进行纯化。提升PCR产物纯化效率要点合集如下：1.模板纯度，有较多蛋白或其他杂质时，会一定程度影响pcr效率；2...
ELISA实验洗板技术详细说明2024/3/4
正确的洗涤和冲洗方案尤其重要。在下游分析过程中，不充分、不一致和/或过度清洗会造成问题。有许多洗板的方法，包括使用自动洗板机、手动分流器或洗瓶。当手动吸出孔中的液体时，要注意不要碰到孔的底部--吸管的...
细胞培养具体过程2024/2/26
细胞培养：是指将活细胞（尤其是分散的细胞）在体外进行培养的方法。细胞培养的一般过程:一、准备工作准备工作对开展细胞培养异常重要，工作量也较大，应给予足够的重视，推备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或...
标准溶液自配须具备的基本要求2024/2/18
标准溶液（standardsolution）在滴定分析中常用作滴定剂。在其他的分析方法中用标准溶液绘制工作曲线或作计算标准。标准溶液提取有两种方法，一种是直接制备对照品，另一种是已知准确浓度的标准溶液...
微生物菌株复苏操作流程及注意事项2024/2/5
微生物菌株操作流程：菌株复苏：（按三区划线法将留菌管内的原始菌株进行复苏）1、所有菌株，显色培养基分4区，每区一株，标明菌株号、菌种名常用缩写如下：cal:白念珠菌cgl：光滑念珠菌cpa:近平滑念珠...
ELISA实际测定操作中温育注意事项2024/1/29
温育是ELISA测定中影响测定成败最为关键的一个因素。ELISA作为一种固相免疫测定，抗原抗体的结合反应在固相上进行，要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原全结合，必须在一定的温度条件下反应一...
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