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PCR引物退火温度综述2023/5/23
引物退火温度引物的另一个重要参数是熔解温度（Tm）。这是当50％的引物和互补序列表现为双链DNA分子时的温度。Tm对于设定PCR退火温度是必需的。在理想状态下，退火温度足够低，以保证引物同目的序列有效...
科学保存血清要点汇集2023/5/15
科学保存血清要点汇集如下：1、需要长期保存的血清必须储存于-20℃-70℃低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月.由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空...
ELISA检测实验样本的使用说明2023/5/8
ELISA的检测目的是为了实验提供准确的实验依据，为了保证实验数据的可靠性，在实验过程中必须坚持全面的质量控制和全过程质量控制，在收集标本前都必须有一个完整的计划。ELISA样本的处理：1、血清：室温...
无血清细胞培养基应用指南2023/5/4
经历了天然培养基、合成培养基后，无血清培养基和无血清培养成为当今细胞培养领域的一大趋势。采用无血清培养可降低生产成本，简化分离纯化步骤，避免病毒污染造成的危害。无血清培养基，一般是在合成培养基的基础上...
细胞迁移实验步骤2023/4/23
细胞迁移即细胞划痕法，是测定细胞迁移运动与修复能力的方法，类似体外伤口愈合模型。在体外培养皿或平板培养的单层贴壁细胞上，用微量枪头或其他硬物在细胞生长的中央区域划线，去除中央部分的细胞，然后继续培养细...
ELISA试剂盒加样时问题解析2023/4/20
ELISA试剂盒加样时可能遇到的问题：1、过长(特别是室内温度较高时)。2、手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间。3、加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外，血清或血浆标本分离不好即进行加样。E...
ELISA实验试剂的预备事项2023/4/11
ELISA试验成功的条件之一是试剂的预备是否充沛、保存是否正确。那么ELISA实验试剂的预备事项如下：1、标准品的稀释和运用：在运用前2小时内预备。将冻干品管内参加1ml样品稀释液，*溶解后做倍比稀释...
PCR反应条件把控2023/3/20
PCR反应条件的把控1.PCR反应的缓冲液提供合适的酸碱度与某些离子。2.镁离子浓度总量应比dNTPs的浓度高，常用1.5mmol/L。3.底物浓度dNTP以等摩尔浓度配制，20～200umol/L。...
设计引物应遵循原则总结2023/3/13
引物是PCR特异性反应的关键，PCR产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。...
elisa试剂盒实验液体类标本收集流程2023/3/6
为了更好的进行elisa试剂盒实验，elisa试剂盒实验液体类标本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。接下来为大家简单讲述一下elisa试剂盒收集标本流程，希望以下介绍对大家有所帮...
PCR反应DNA 复制所需的基本要素2023/2/27
聚合酶链式反应（PolymeraseChainReaction，PCR）是一项利用DNA双链复制原理，在生物体外复制特定DNA片段的的核酸合成技术。可在短时间内大量扩增目的DNA片段，而不必依赖大肠杆...
防止ELISA污染几种方法2023/2/20
防止ELISA污染几种方法：污染会在ELISA数据的下游分析中造成许多问题，如孔与孔之间的高差异、高背景值和弱或低信号强度。有几种方法可以防止污染：1.在一个干净的环境中工作；2.通过去离子或蒸馏对所...
荧光定量试剂盒基本反应步骤2023/2/14
PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：1、模板DNA的变性：模板DNA经加热至94℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下...
ELISA试剂盒蔗糖封闭的原理2023/2/10
ELISA的试剂盒说明上写封闭液用蔗糖溶液，一般是用BSA或酪蛋白的蛋白分子封闭空白位点，蔗糖封闭的原理：1、ELISA实验中，蔗糖本身没有封闭作用;2、封闭液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等...
大鼠表皮黑色素细胞培养操作2023/1/29
大鼠表皮黑色素细胞培养操作:1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然...
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