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货号 | FS-X10122 |
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产品介绍:
用途: 布氏杆菌染色,又称为科兹洛夫斯基染色或柯兹洛夫斯基染色。 注意事项: 染色结果为:布氏杆菌呈球杆状,淡红色,其他呈绿色。 储存条件:室温,避光,12个月 |
中文名称:布氏杆菌染色液
英文名称:
产品规格:2×50ml|2×100ml
货号:FS-X10122
实验报告:
一、分离与培养: 1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小; 2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置; 3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化; 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养; 5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养; | 二、免疫荧光鉴定: 1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min; 2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min; 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜; 5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h; 6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
培养操作步骤:
1.公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
薄层菌属丝裂原活化蛋白激3抗体Human INPPL1 (Phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate 5-phosphatase 2) 犬组织因子(TF)免疫试剂盒
总状毛霉雌激受体α抗体Human HCAR3 (Hydroxycarboxylic acid receptor 3) 犬组(HIS)免疫试剂盒
土壤短芽胞杆菌雌激受体β 抗体Human UGT1A6(UDP-glucuronosyltransferase 1-6) 犬转移生长因子β1(TGF-β1)免疫试剂盒
根霉上皮特异性抗原抗体Human IPMK (Inositol polyphosphate multikinase) 犬肿瘤坏死因子α(TNF-α )免疫试剂盒
头孢霉内皮-1抗体Human INPPL1 (Phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate 5-phosphatase 2) 犬脂多糖/内(LPS)免疫试剂盒
黑曲霉天冬蛋白家族蛋白抗体Human UGT1A6(UDP-glucuronosyltransferase 1-6) 犬脂蛋白脂(LPL)免疫试剂盒
迂回壳囊孢蝮蛇蛇蛋白抗体Human HCAR2 (Hydroxycarboxylic acid receptor 2) 犬孕激/孕(PROG)免疫试剂盒
巴贝斯虫未定种(伊宁株)转录因子E2F-2抗体Human HCAR3 (Hydroxycarboxylic acid receptor 3) 犬诱导型一氧化氮合成(iNOS)免疫试剂盒
天麻蜜环菌A9*内皮受体蛋白酪激抗体Human INSM1(Insulinoma-associated protein 1) 犬游离脂肪(FFA)免疫试剂盒
棒弯孢酪蛋白激受体B2抗体Human HMGCS2 (Hydroxymethylglutaryl-CoA synthase, mitochondrial) 犬游离状腺原(Free-T3)免疫试剂盒
蜡状芽孢杆菌磷化雌激受体ER alpha 抗体Human INSM2 (Insulinoma-associated protein 2) 犬游离甲状腺(FT4)免疫试剂盒
须芒草伯克霍尔德氏菌重组增强型绿色荧光蛋白抗体Human HEMK1 (HemK methyltransferase family member 1) 犬抑制β-B(Inhbb)免疫试剂盒
绿针假单胞菌雌激受体α抗体(用于western blot)Human HRAS(GTPase HRas) 犬乙型肝炎表面抗原(HBsAg)免疫试剂盒
鸡葡萄球菌雌激受体α/β抗体Human HSD17B1(Estradiol 17-beta-dehydrogenase 1) 犬乙酰受体抗体(AChRab)免疫试剂盒
拟枝孢镰孢自分泌运动因子抗体Human IL1RL2 (Interleukin-1 receptor-like 2) 犬胰腺甘油三酯脂(PNLIP)免疫试剂盒
平菇—紫孢侧耳酪蛋白激A3受体抗体Human UGT1A1(UDP-glucuronosyltransferase 1-1) 犬胰高血糖样肽1(GLP1)免疫试剂盒
酿酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 质量规格:分析标准品,99.5%吴茱萸总碱
假蜜环菌Armillariella│sp. 质量规格:分析标准品,99.8%苏糖
副溶血弧菌Vibrio│parahaemolyticus 质量规格:分析标准品,≥98%阿卡波糖
布氏杆菌染色液松口蘑 3,4,5-三苯中性蛋白
巴斯德毕赤酵母 3-甲基噻吩抗坏血氧化
滑假丝酵母 N-氨基-3-氮杂双环[3.3.0]辛烷盐盐D-半乳糖酯还原
糙皮侧耳 3,4-二肌加氧
孢篮状 4-氨基-3-溴三氟甲苯麦角蛋白
美澳型核果褐腐病 4-羟基-2-甲姜辣
海境芽孢杆 5-羟基-2-甲果聚糖
大肠埃希 磺脒Na-K-ATP
邻单胞属* 枸橼铋葡萄糖
葡萄座腔 D-对羟基苯甘甲酯盐盐木质
大肠埃希 2-甲酯类黄酮葡萄糖转移
动物源细耐药性检测板-金黄色葡球 5,5-二苯基海因霉
矩圆黑盘孢 4--3-溴甲苯ataxin-3抗体
卡尔斯伯酵母 2-甲氧基苯过氧化物
黄曲霉 4-甲苯果糖-1,6-二磷缩
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