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当前位置：上海抚生实业有限公司>>细胞生物学试剂>>细胞组织染色>> 台盼蓝染色液
| 货号 | FS-X9839 |
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产品介绍:
台盼蓝染色液主要用于细胞染色，用来检测细胞的存活率。台盼蓝受到活体细胞的排斥，而死亡细胞摄入染料显示蓝色。通过常用的光学显微镜可以观察到细胞染色情况，同时可以定量计数，实现对细胞存活率比较精确的定量分析。 储存条件：4℃保存。 有效期：一年。 |
中文名称：台盼蓝染色液
英文名称：
产品规格：100T
货号：FS-X9839
实验报告：
一、分离与培养： 1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小； 2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置； 3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化； 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养； 5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养； | 二、免疫荧光鉴定： 1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min； 2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min； 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜； 5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h； 6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
培养操作步骤：
1．公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
乙阿比特龙酯英文名： Dorzolamide HCl富含半胱C端蛋白1抗体包装5g
异环磷酰英文名： Doxazosin MesylateE1A激活基因激蛋白2抗体包装1g
扎西他滨,2',3'-二脱氧胞英文名： Doxazosin Mesylate壁合成蛋白43抗体包装5g
子囊霉英文名： Doxorubicin HCl/Adriamycin19号染色体开放阅读框29抗体包装1g
紫杉英文名： Doxorubicin HCl/Adriamycin磷化p21蛋白抗体包装250mg
左亚叶钙；酰四氢叶钙英文名： Doxycycline HCl磷化周期检测点激2抗体包装25g
阿卡地新(AICAR)英文名： Doxycycline HCl磷化钙/钙调依赖蛋白激2α抗体包装5g
阿利克仑半富马盐英文名： Menadione磷化周期依赖性激2抗体包装100g
阿齐沙坦英文名： Menadione磷化周期检测点激1抗体包装25g
阿司，阿西莫司英文名： Econazole nitrate磷化P27抗体/周期依赖激抑制剂抗体包装25g
折地平英文名： Econazole nitrate磷化α-连环蛋白抗体包装5g
安倍生坦英文名： Entecavir周期E2抗体包装5g
力农英文名： Entecavir磷化钙/钙调依赖蛋白激CAMK2B/D/G抗体包装250mg
地平英文名： Epalrestat 肿瘤易感候选基因3抗体包装100g
奥美沙坦；奥美沙坦英文名： Epirubicin HCl磷化肿瘤易感候选基因3抗体包装25g
华癸中间根瘤菌Mesorhizobium│huakuii 质量规格：>98%,BR胰岛淀粉样多肽试剂盒盐碱;Ephedrine hydr
CBS7227=IFO10179资源名称: 假白布勒酵母 质量规格：>95%脂溶性的原激活肽试剂盒原人参三;Protopanaxatri
栖热菌Thermus│sp. 质量规格：≥98%,BR原Ⅱ试剂盒原人参二;Protopanaxdiol
台盼蓝染色液中国克鲁维酵母 6-水杨重组人脂肪因子
黄色短杆 N,N',N'',N''',N'''',N'''''-六-O-乙酰基壳六糖成纤维生长因子13
猴头 制霉药敏纸片补体C5转化
金黄壳囊孢 氨苄青霉药敏纸片特异性IgG抗体
贝雷丝孢酵母 异铝KI67抗原
球孢白僵 丁香连氮β肌动蛋白
总状毛霉 大孔树脂XDA-1β肌动蛋白
沼泽红假单胞 D-腺病抗体
大肠埃希氏 愈创木酚支原体
溶杆 邻苯二甲核因子κB抑制物激
串珠镰刀 羊毛脂总胆固
氧化微杆 双酚 白介13
核青霉 高效氟菊酯凝血
类芽孢杆 环沙星FAT4
明尼苏达被毛孢 邻苯二甲二癸酯高分子量脂联
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