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天青石蓝B染色液

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所  在  地上海市

更新时间:2022-05-16 15:29:14浏览次数:364次

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货号 FS-X10054
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Phospho-Vim

中文名称:天青石蓝B染色液

英文名称:

产品规格:50ml|100ml

货号:FS-X10054

产品介绍:

用途:

苏木素染色

注意事项:

染色效果好于普通苏木素伊红染色。

储存条件:4℃,避光,12个月

培养操作步骤:

1.公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;

2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);

3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;

4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;

5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。

实验报告:

一、分离与培养:

1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;

2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

二、免疫荧光鉴定:

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;

2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

操作规程

1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。

8、结果分析

a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)

金黄壳囊孢4号染色体开放阅读框51抗体Human SMOX(Spermine oxidase) 人结核菌杆(TB)抗体(IgA)免疫试剂盒

海角副球菌分支GBE1抗体Human AMOT(Angiomotin) 人结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)免疫试剂盒

拟茎点霉磷化丝切蛋白抗体Human P7(Caspase-7) 人结缔组织活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)免疫试剂盒

平田头菇补体成分5受体1抗体Human NEFH(Neurofilament heavy polypeptide) 人结蛋白(DES)抗体免疫试剂盒

广岛链霉菌分裂周期2样蛋白激6抗体Human HSD11B1(Corticosteroid 11-beta-dehydrogenase isozyme 1) 人结蛋白(Des)免疫试剂盒

硬结节杆菌补体C3IP1抗体Human SEMA3A(Semaphorin-3A) 人角化生长因子(KGF)免疫试剂盒

果生链核盘菌磷化周期检测点激2抗体Human HRG(Histidine-rich glycoprotein) 人角化内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)免疫试剂盒

异常汉逊酵母变种周期依赖性激11抗体Human SMOX(Spermine oxidase) 人胶转蛋白(TAGLN)免疫试剂盒

芬娜冬菇周期依赖性激10Human SSTR2(Somatostatin receptor type 2) 人胶质系来源的神经营养因子(GDNF)免疫试剂盒

枯草芽胞杆菌枯草亚种8号染色体开放阅读框86抗体Human P7(Caspase-7) 人胶原吡啶交联(PYD)免疫试剂盒

特异青霉(产黄青霉)磷化分裂周期蛋白25B抗体Human NEFH(Neurofilament heavy polypeptide) 人降脂(Adipsin)免疫试剂盒

血痕韧革菌磷化分裂周期蛋白25B抗体Human AMOT(Angiomotin) 人降钙原(PCT)免疫试剂盒

盐古杆菌磷化半胱蛋白蛋白6抗体Human APLN(Apelin) 人降钙基因相关肽(CGRP)免疫试剂盒

高卢蜜环菌9号染色体开放阅读框172抗体Human GAS1(Growth arrest-specific protein 1) 人降钙(CT)免疫试剂盒

球孢白僵菌磷化P27抗体/周期依赖激抑制剂Human MASP2(Mannan-binding lectin serine protease 2) 人碱性胎儿蛋白(BFP)免疫试剂盒

发酵成对杆菌表面趋化因子受体4相关蛋白2抗体Human TFR2(Transferrin receptor protein 2) 人碱性磷(ALP)免疫试剂盒

冷海黄杆菌Flavobacterium│frigidimaris 质量规格:AR白皮杉;

大肠埃希氏菌Escherichia│coli 质量规格:AR紫草呋喃A

外来毛霉Mucor│adventitius 质量规格:IND光萼野百合碱;乌沙拉明 光萼猪屎豆碱;
天青石蓝B染色液醋杆科 1,4-二代丁烷无翅型MMTV整合位点家族成员7B

弯孢 2-羟基苯丝蛋白1

粉红单端孢 邻氨基苯盐盐易洛魁族同源盒基因5

纹孢青霉 三羧三乙酯接触蛋白相关蛋白样4

绳状青霉 乙二二硬脂受体相互作用蛋白1

传染性法氏囊病病 氟化氢吡啶络合物受体相互作用蛋白3

发酵乳杆 3-(三氟甲氧基)苯甲酰过氧化物4

纽缠丛梗孢 二乙氢盐,98%检测Arl6ip5

孟氏假单胞 4-溴-2-(三氟甲基)苯甲肝癌源性生长因子

假单胞属 N-烯自噬相关蛋白5

松生拟层孔 Fmoc-Leu-OPfp自噬相关蛋白7

苏云金芽孢杆 N-甲基正β-己糖亚基α

运动发酵单胞运动亚种 6-羟基-2H-苯并呋喃-3-酮亚硝基还原

诺卡氏属 FMOC-L-缬五氟苯酯补体成分1q受体

黄单胞 2--6-硝基喹喔啉肾母过度表达基因

 


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