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当前位置：上海抚生实业有限公司>>细胞生物学试剂>>细胞组织染色>> Rhodamine 123染色液
| 货号 | FS-X9837 |
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产品介绍:
Rhodamine 123染色液可用于细胞凋亡检测，Rhodamine 123 是一种细胞通透性的、阳离子的荧光探针，容易被有活性的线粒体摄取，没有细胞毒性，Rhodamine 123由于带阳离子所以当线粒体膜电位存在的时候就会透过细胞膜在活细胞的线粒体内聚集，发出黄绿色荧光，而当膜电位下降的时候，聚集的Rhodamine 123 就减少，从而发光强度降低。 Rhodamine 123 常与Cy5和AMCA (Aminomethylcoumarin Acetate)等组合进行多色荧光分析,相互间无颜色交叉;分析细胞凋亡时,可用Rhodamine 123 来检测线粒体的膜电位,而用NAO 来检测线粒体结构的完整性。Rhodamine 123，可用于对许多种细胞进行染色，包括植物细胞和细菌。由于细胞内ATP的量与Rhodamine 123的荧光强度之间有相关性，Rhodamine也可应用于检测细胞内的ATP。 储存条件：4℃避光保存。长期保存-20℃避光保存。 有效期：六个月。 |
中文名称：Rhodamine 123染色液
英文名称：
产品规格：100T
货号：FS-X9837
实验报告：
一、分离与培养： 1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小； 2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置； 3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化； 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养； 5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养； | 二、免疫荧光鉴定： 1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min； 2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min； 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜； 5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h； 6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
培养操作步骤：
1．公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
英文名： Cyclosporine A磷化原癌基因c-kit抗体包装5g
拓扑替康盐盐英文名： Ticlopidine HCl磷化原癌基因c-kit抗体包装5g
维酰酚英文名： Ticlopidine HCl胸腺基质淋巴生成受体抗体包装25g
维罗非尼,RG7204英文名： Cytarabine磷化非受体酪激c-Abl抗体包装5g
戊柔比星英文名： Cytarabine磷化非受体酪激c-Abl抗体包装1g
西地尼布;AZD2171英文名： Cytarabine蛋白磷激PKC/CPI-17抗体包装5g
西地尼布马来盐英文名： Dacarbazine磷化非受体酪激c-Abl抗体包装1g
亚叶钙英文名： Dacarbazine磷化非受体酪激c-Abl抗体包装1g
盐阿糖胞英文名： Dasatinib胰辅脂抗体包装5g
盐埃罗替尼英文名： Dasatinib19号染色体开放阅读框45抗体包装5MG
盐昂丹司琼英文名： Daptomycin过氧化氢诱导转录蛋白1抗体包装5MG
盐达莫司汀英文名： Daptomycin核因子NFκB激活蛋白1抗体包装100g
盐表阿霉英文名： Daunorubicin HCl第12号染色体开放阅读框23抗体包装25g
盐/盐阿霉英文名： Daunorubicin HClγ-连环/连接蛋白γ抗体包装5g
盐英文名： Daunorubicin HCl10号染色体开放阅读框4抗体包装100g
链霉菌属Streptomyces│sp. 质量规格：含量测定胰岛受体底物2试剂盒盐拓扑替康;Topotecan hyd
胶孢Glomerella│cingulata (Stoneman) Spauld. & H. Schrenk 质量规格：>99.0%胰岛受体底物1试剂盒延龄草;Diosgenin gluco
小珊瑚球菌Corallococcus│exiguus 质量规格：HPLC>99.0%,标准品胰岛受体β试剂盒异槲皮;Isoquercitrin
Rhodamine 123染色液山羊葡萄球 新生牛血清500ml/XQ-A0500磷化信号转导分子SMAD-2
克鲁斯假丝酵母 新生牛血清100ml/XQ-A0100磷化信号转导分子SMAD-7
泡盛曲霉 新生牛血清50ml/XQ-A0050核糖基转移1
薄层 稳定剂，500ml装/CT-0500脂联β样1
酿酒酵母 稳定剂，200ml装/CT-0200胰岛抗体
稳定剂，50ml装/CT-0050神经调节蛋白4
仙芝(灵芝属之一种) 稳定剂，10ml装/CT-0010血管紧张转化1
香菇 蛋白/稳定剂/PS-050血管紧张转化1
嗜盐细属 蛋白/稳定剂/PS-010流行性出血热IgG抗体
短小克银汉霉 蛋白/稳定剂/PS-00115-deoxy-前列腺J2
伤门氏 粘附液/301-026-015抗能受体M2抗体
干草鞘氨单胞 粘附液/301-025-015CD64分子
黄杆 蛋白胶染液 /300-692-1000磷乙磷
假单胞属 蛋白胶染液 /300-692-500p38丝裂原活化蛋白激
天青链霉 AquaSafe 安全保鲜剂/22-100-01神经肽S
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