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货号 | FS-X10145 |
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产品介绍:
用途: 烟曲霉菌等染色 注意事项: 染色后孢子与菌丝呈蓝色。 储存条件:室温,避光,12个月 |
中文名称:乳酸酚棉蓝染色液
英文名称:
产品规格:50ml|100ml
货号:FS-X10145
实验报告:
一、分离与培养: 1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小; 2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置; 3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化; 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养; 5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养; | 二、免疫荧光鉴定: 1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min; 2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min; 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜; 5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h; 6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
培养操作步骤:
1.公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
鸭疫里氏杆菌成纤维生长因子受体4抗体Human CDIPT (CDP-diacylglycerol–inositol 3-phosphatidyltransferase) 牛单核趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫试剂盒
嘴突凸脐蠕孢凝血原(纤维介)抗体Human KIN1 (Caskin-1) 牛催乳(PRL/LTH)免疫试剂盒
牛布氏菌阳性血清国家标准品(虎红平板)衰老关键蛋白抗体Human CMYA5 (Cardiomyopathy-associated protein 5) 牛催产(OT)免疫试剂盒
Rhizobium 凋亡调节基因之一抗体Human CRTAC1 (Cartilage acidic protein 1) 牛促性腺激释放激(GnRH)免疫试剂盒
塔氏糖多孢菌凋亡调节基因之一抗体(短型)Human NCAM2(Neural cell adhesion molecule 2) 牛促肾上腺皮质激(ACTH)免疫试剂盒
铜绿假单胞菌纤维连接蛋白抗体Human CABS1 (Calcium-binding and spermatid-specific protein 1) 牛促卵泡(FSH)免疫试剂盒
大肠埃希菌FosB蛋白抗体Human MICU1(Calcium uptake protein 1, mitochondrial) 牛促甲状腺(TSH)免疫试剂盒
金黄壳囊孢FRA2/FOSL2抗体Human CAPS2 (Calcyphosin-2) 牛雌(E1)免疫试剂盒
坟墓节杆菌叉头蛋白P3抗体Human CCIN (Calicin) 牛雌三(E3)免疫试剂盒
枯草芽孢杆菌成纤维生长因子8抗体Human CAMSAP1 (Calmodulin-regulated spectrin-associated protein 1) 牛雌激(E)免疫试剂盒
土曲霉肌动蛋白结合蛋白Fascin抗体Human AP1M1(AP-1 complex subunit mu-1) 牛雌二(E2)免疫试剂盒
烧土正青霉线粒体裂变1蛋白抗体Human COMTD1 (Catechol O-methyltransferase domain-containing protein 1) 牛成纤维生长因子23(FGF23)免疫试剂盒
鸡纵菌叉头蛋白P1抗体Human Q1 (Calsequestrin-1) 牛成纤维生长因子21(FGF21)免疫试剂盒
苹果锥梗孢鼠疫F1蛋白/鼠疫耶尔森氏菌荚膜抗原F1单克抗体Human CTNND1 (Catenin delta-1) 牛长链脂酰CoA脱氢(ACADL)免疫试剂盒
噬尼古丁节杆菌纤维母生长因子5抗体Human CTCF (Transcriptional repressor CTCF) 牛草酰乙免疫试剂盒
微紫青霉脆性X综合征相关蛋白AFF1抗体Human CTNNBIP1 (Beta-catenin-interacting protein 1) 牛布鲁氏杆菌抗体(IgM)免疫试剂盒
壁芽孢杆菌Bacillus│muralis 质量规格:standard for GC,≥99.5%(GC)L-天冬酰
巴贝斯虫未定种(伊宁株)Babesia│sp. 质量规格:Standard for GC,≥99.5%(GC)L-天冬
地芽孢杆菌Geobacillus│sp. 质量规格:Standard for GC ,>99%(GC)L-苏
乳酸酚棉蓝染色液香菇 4-羟基喹唑啉蛋白质二硫键异构
草青霉 4-溴丁甲酯类钙调磷B蛋白
假单胞属 5--1-甲基-4-硝基咪唑纤维合成
果生链核盘 果糖二磷钠水合物可溶性果胶
三棱孢小囊 粘KORRIGAN
氏假单胞 2,4,6-三羟基苯甲端粒逆转录
解淀粉周培瑾氏 溴甲基喹啉酮; 4-溴甲基喹啉-2-酮还原型辅Ⅰ
皱曲毛壳 3-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡抗维生C氧化
鼠乳杆 2-苯并咪唑丝棕榈酰转移
酿酒酵母 优力肤(克罗他通)β-半乳甘露聚糖
酿酒酵母 表雄酮β-半乳糖甘露聚糖
福氏志贺氏 n-已基三苯基膦NAD激
蜡状芽孢杆 环戊基异酯NAD激
细链格孢 辛基膦末端脱氧核转移
美澳型核果褐腐病 草甘薯病2
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