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货号 | FS-X10173 |
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中文名称:GUS染色液
英文名称:
产品规格:100ml
货号:FS-X10173
产品介绍:
用途: 用于生物化学活性分析、免疫分析以及组织和细胞的组织化学染色,多用于转基因植物的GUS基因表达。 注意事项: 染色原理是适宜的反应条件下,β-葡萄糖苷酶(GUS)可将X-Gluc水解成蓝色物质,该物质不溶解于转基因的细胞核组织中的靛蓝物质,具有GUS活性的部位或位点呈现蓝色或蓝色斑点,可用肉眼或显微镜观察到。 储存条件:-20℃,避光,12个月 |
培养操作步骤:
1.公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验报告:
一、分离与培养: 1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小; 2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置; 3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化; 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养; 5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养; | 二、免疫荧光鉴定: 1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min; 2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min; 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜; 5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h; 6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
巴氏醋杆菌GDP甘露糖焦磷化抗体Human WDR46 过氧化氢(CAT)免疫试剂盒
柱孢犁头霉G蛋白偶联受体171抗体Human WDR18 还原(GR)免疫试剂盒
新城疫病神经膜糖蛋白M6bHuman WDR55 S转移(GSTs)免疫试剂盒
球孢白僵菌鸟激GMK抗体Human WARS2 睾(T)免疫试剂盒
密褐褶菌半乳糖脑脂抗体Human WDR16 分泌型免疫球蛋白A(sIgA)免疫试剂盒
高卢蜜环菌G蛋白偶联受体激5抗体Human WBP1 单核趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫试剂盒
韩芝GTP结合蛋白REM1抗体Human WBP11 促卵泡(FSH)免疫试剂盒
楚氏喜盐芽孢杆菌磷化糖原合激-3α抗体Human WASL 雌激(E)免疫试剂盒
微杆菌生长分化因子7抗体Human ACHE(Acetylcholinesterase) 雌二(E2)免疫试剂盒
外外安德伦茨氏菌葡萄糖激调节蛋白抗体Human WBP2 层连蛋白/板层(LN)免疫试剂盒
樟疫霉γ谷酰半胱合成抗体(γ-GCSc)Human VSTM2L 补体蛋白4(C4)免疫试剂盒
佐贝尔梅奇酵母GCOM1蛋白抗体Human VSX2 补体蛋白3(C3)免疫试剂盒
异常威克汉姆酵母葡萄糖果糖还原2抗体Human VSX1 白三烯C4(LTC4)免疫试剂盒
大肠埃希菌胶质系源性神经营养因子受体α1样蛋白抗体Human VSX1 白介8(IL-8/CXCL8)免疫试剂盒
金龟子假丝酵母GHDC蛋白抗体Human VSX2 白介2受体(IL-2R)免疫试剂盒
大肠埃希菌甘油激5抗体Human LECT2(Leukocyte cell-derived chemotaxin-2) 白介15(IL-15)免疫试剂盒
ATCC19098=CIP106986=DSM20167=KCTC3196=LMG16694=MTCC1528=NBRC12678=NRRLB-14730.资源名称: 硫磺色节杆菌 质量规格:Standard for GC≥97.0%(GC)11-O-罗汉果V
间座壳Diaporthe│sp. 质量规格:分析标准品, ≥99.5% (GC)二咖啡酰菊苣
Pseudonocardia alaniniphilaPseudonocardia│alaniniphila 质量规格:standard for GC,≥99%(GC)3,4,5-三咖啡酰奎宁
GUS染色液枯草芽孢杆 3--2-甲苯叉头框蛋白01
白僵 6-哒-3-羧叉头型基因P3
普通变形杆 2-乙酰基-5-硝基吡啶肠三叶因子
苏云金芽孢杆蜡螟亚种 2-氨基-3,5-二溴苯甲肠脂肪结合蛋白
坟墓节杆 2,6-二氟溴苄超敏C反应蛋白
水生黄杆 反式-4-氨基环己盐盐超氧化物歧化
费氏中华根瘤 1,4-二(2-苯并恶唑基)萘超氧化物歧化1
长双歧杆 乳清单水合物沉默调节蛋白1
串珠镰孢 2-氨基苯并噻唑-6-羧乙酯成熟促进因子
黄海鞘氨盒 2,4,5-三成纤维生长因子
枯草芽胞杆枯草亚种 3--2,5-二氟吡啶成纤维生长因子2
针叶树散斑壳 2--4-甲成纤维生长因子21
酱油曲霉 2-丁基咪唑成纤维生长因子23
露湿漆斑 次叔丁酯穿孔;成孔蛋白
节杆 2,4-二氨基-6-[2-(2-十一烷基-1-咪唑基)乙基]-1,3,5-三雌二
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