13524666654
当前位置：上海抚生实业有限公司>>细胞生物学试剂>>细胞组织染色>> 溶酶体红色荧光探针
| 货号 | FS-X9777 |
|---|
培养操作步骤：
1．公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
中文名称：溶酶体红色荧光探针
英文名称：Lysosome Tracker Red
产品规格：50μl
货号：FS-X9777
产品介绍:
本探针一种溶酶体红色荧光探针，可以用于活细胞溶酶体特异性荧光染色。 本探针为采用Molecular Probes公司的DND 99进行了荧光标记的带有弱碱性的荧光探针，可以选择性地滞留在偏酸性的溶酶体中，从而实现对于溶酶体的特异性荧光标记。中性红(Neutral Red)和橙(Acridine Orange)也都可以对溶酶体进行荧光染色，但中性红和橙的染色缺乏特异性。 本探针呈红色荧光，检测时的大激发波长为577nm，大发射波长为590nm。按照1:20000的比例稀释，可以配制1000ml探针工作液。 储存条件：-20℃避光，有效期6个月。 |
实验报告：
一、分离与培养： 1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小； 2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置； 3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化； 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养； 5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养； | 二、免疫荧光鉴定： 1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min； 2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min； 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜； 5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h； 6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
轻肽铁蛋白(FTL)英文名：FTL 1号染色体开放阅读框220抗体包装5g
轻肽神经丝蛋白(NEFL)英文名：NEFL 钙磷蛋白1抗体包装1g
亲环B(CYPB)英文名：CYPB 钙磷蛋白2抗体包装25mg
亲环A(CYPA)英文名：CYPA 磷化通道相互作用蛋白3抗体包装1g
鞘磷脂(SPH)英文名：SPH 16号染色体开放阅读框61抗体包装250mg
鞘1磷酯受体1(S1PR1)英文名：S1PR1 视锥感光环磷鸟门控通道蛋白CNG3抗体包装5g
鞘1磷酯裂解1(SGPL1)英文名：SGPL1 环核门控阳离子通道蛋白β3/CNG-β3抗体包装1g
桥粒芯胶粘蛋白1(DSC1)英文名：DSC1 非受体酪激c-Abl抗体包装100MG
强啡肽(Dyn)英文名：Dyn 卷曲螺旋结构域蛋白152抗体包装100MG
前脑啡肽(PENK)英文名：PENK 甘油二酯磷转移抗体包装25mg
前列腺性磷(ACP3)英文名：ACP3 嗜铬粒B抗体包装1g
前列腺E受体2(EP2)英文名：EP2 血管加压激活钙启动受体蛋白1抗体包装5g
前列腺E合2(PTGES2)英文名：PTGES2 色P450Ⅱj3抗体包装1g
前胶原C端蛋白增强子1(PCPE1)英文名：PCPE1 钙激活离子通道4抗体包装250mg
前动力蛋白受体1(PKR1)英文名：PKR1 周期依赖性激6抗体包装5g
炭疽芽胞杆菌Bacillus│anthracis 质量规格：> 98%,合物标准品肿瘤坏死因子相关激活诱导因子试剂盒紫草;Lithosprmoside
拘橼杆菌Citrobacter│sp. 质量规格：纯度> 98.5%,BR,二合物肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体3试剂盒猪去氧胆;Hyodeoxycholic
: F536资源名称: 黄曲霉 质量规格：纯度> 98%肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体2试剂盒竹节香附A;Raddeanin(Ane
溶酶体红色荧光探针黄曲霉 2-溴-3-氟循环复合物
黄粘盖牛肝 3-氨基-2-硝基吡啶烟酰单核转移3
宇佐美曲霉 2-二苯基膦-6-烟酰腺二核
弯孢 1-甲氧基羰酰氨基-7-萘酚烟酰腺二核磷
杂色曲霉 N-异基-4-甲酰基苯甲酰炎症因子3;穿透
肺形侧耳 乙肼氧化低密度脂蛋白
Au141（黑木耳） 1-羟基-2-萘苯酯氧化低密度脂蛋白抗体
广食黄杆 对氨基苯甲-3-磺氧化高密度脂蛋白
聚生壳 N-(三苯甲基)-L-天冬酰氧化磷脂
草假单胞 乙二四乙四钠四水化合物氧化型
松口蘑 2-苯基钠四水合物
青榨槭叶斑病 2-氧-1-咪唑烷一氧化氮
多根硬皮马勃 罗哌盐盐一氧化氮合成
大肠杆 4-甲硫基衣原体抗体
葡枝根霉 4--2-胰蛋白
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
请输入账号
请输入密码
请输验证码
以上信息由企业自行提供，信息内容的真实性、准确性和合法性由相关企业负责，仪表网对此不承担任何保证责任。
温馨提示：为规避购买风险，建议您在购买产品前务必确认供应商资质及产品质量。
仪表网