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| 货号 | FS-X9779 |
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中文名称：伊红染色液
英文名称：Eosin Staining Solution
产品规格：100ml
货号：FS-X9779
产品介绍:
本染色液操作简单，不使用汞、甲醇等有毒试剂，可以用于组织切片或培养细胞的染色。本伊红染色液染色后细胞浆呈粉红色或红色。本染色液可以和免疫荧光染色或免疫组化染色配合使用。一方面可以在本伊红染色液染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色，另一方面也可以在免疫组化染色后再进行伊红复染。本染色液可以重复使用，直至认为效果不佳时再换用新的染色液。一个包装的本染色液至少可以染色200个样品。 注意事项： 1. 需自备4%多聚、70%乙醇和95%乙醇。如果需要脱水、透明和封片处理，还需自备二甲苯，中性树胶或其它封片剂。如果样品是石蜡切片，需自备90%乙醇，无水乙醇以及二甲苯。 2. 染色液可以重复使用多次，认为效果不佳时再更换新的染色液。 3. 第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。 储存条件：室温，有效期一年。 |
培养操作步骤：
1．公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验报告：
一、分离与培养： 1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小； 2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置； 3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化； 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养； 5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养； | 二、免疫荧光鉴定： 1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min； 2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min； 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜； 5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h； 6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
ⅩⅢ(F13)英文名：F13 囊性纤维化跨膜转运调节因子抗体包装250mg
Ⅹ(F10)英文名：F10 酪蛋白激2相互作用蛋白1抗体包装1g
子Ⅸ(F9)英文名：F9 CD40L抗体包装25g
Ⅷ(F8)英文名：F8 α-s1酪蛋白抗体包装5g
Ⅶ(F7)英文名：F7 CIDEB抗体包装5ml
Ⅴ(F5)英文名：F5 高密度脂蛋白受体/清道夫受体抗体包装25g
Ⅱ(F2)英文名：F2 信号转导蛋白亚基7A抗体包装5g
凝血/抗凝血复合体(TAT)英文名：TAT 凋亡抑制因子抗体包装1g
凝溶胶蛋白(GS)英文名：GS D型产气荚膜梭菌抗体包装5g
凝集样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX1)英文名：LOX1 降钙抗体包装1g
镍纹蛋白(METRN)英文名：METRN 20号染色体开放阅读框14抗体包装250mg
尿调蛋白(UMOD)英文名：UMOD 结缔组织生长因子抗体包装25g
尿皮质3(UCN3)英文名：UCN3 性T抗原-4抗体包装1g
尿皮质2(UCN2)英文名：UCN2 降钙受体抗体包装5g
尿皮质1(UCN1)英文名：UCN1 1号染色体开放阅读框38抗体包装100mg
副球菌Paracoccus│sp. 质量规格：纯度>97%肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ试剂盒植;Phytic acid
泊库岛食烷菌Alcanivorax│borkumensis 质量规格：HPLC>98%,标准品肿瘤坏死因子超家族15试剂盒q;fraxinellone
酿酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 质量规格：UV≥98%，标准品肿瘤坏死因子γ试剂盒芝麻酚;Sesamol
伊红染色液枯草芽孢杆 4,4'-双(4-氨基苯氧基)二苯砜胰岛样生长因子结合蛋白-3
黑曲霉3.3928 氧化钴(III)胰岛样生长因子结合蛋白4
米根霉 3-苯乙胰岛样生长因子结合蛋白-6
马杜拉放线 2-甲氧基苯氧基乙乙酯胰岛样生长因子结合蛋白-7
总状共头霉 苯甲氧羰基-DL-色胰岛样因子5
酿酒酵母 烯草酮胰岛原
多根硬皮马勃 溴甲氧胰淀
酿酒酵母 (R)-N-芴甲氧羰基-3-氨基-3-苯基-1-胰高血糖
大叶胡枝子腐朽病 2-溴苯并噻唑-6-羧乙酯胰高血糖样肽1
铜绿假单胞(绿脓杆) 3-氧代环丁基苄酯胰高血糖样肽1.7-36
大豆慢生根瘤 4-氨甲基四氢吡喃胰高血糖样肽2
猪瘟病间接抗体 5-溴-1,3-二氟-2-苄氧基苯胰羧肽B2
多粘类芽胞杆 2--3-溴-5-胰腺癌标志物-CA242
嗜芽孢杆 5-氨基-2-溴-3-吡啶胰腺衍生因子
白色茶树菇 2-羟基异丁酰胰脂肪
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