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货号 | FS-X9897 |
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培养操作步骤:
1.公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
中文名称:硼酸洋红染色液
英文名称:
产品规格:100ml
货号:FS-X9897
产品介绍:
用途: 硼酸洋红染色液主要用于花粉、动植物组织切片等样本中细胞核的染色,亦可用于线粒体的染色 注意事项: 又称格林额史氏硼酸洋红染色液,主要由高浓度硼酸、洋红(也称胭脂红)等组成,pH呈酸性 储存条件:室温,避光,12个月 |
实验报告:
一、分离与培养: 1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小; 2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置; 3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化; 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养; 5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养; | 二、免疫荧光鉴定: 1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min; 2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min; 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜; 5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h; 6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
平滑假丝酵母精加压受体2抗体Human KLF17 小鼠肾损伤分子1(Kim-1)免疫试剂盒
香蕉骨架肌动蛋白样蛋白3抗体Human KIF1C 小鼠肾前体免疫试剂盒
灵芝(红芝, 赤芝)膜粘连蛋白8抗体Human KIF22 小鼠肾(Renin)免疫试剂盒
泰塔温沙壤土杆菌水通道蛋白8抗体Human KIF20A 小鼠肾上腺髓质(ADM)免疫试剂盒
中慢生华癸根瘤菌锚蛋白重复结构域蛋白40抗体Human KIF1B 小鼠肾上腺能a1A受体(ADRA1A)免疫试剂盒
肉梭菌 C型凋亡抑制因子5抗体Human KIF26B 小鼠肾上腺(EPI)免疫试剂盒
炭黑曲霉水通道蛋白-3抗体Human KIF2A 小鼠神经营养因子4(NT-4)免疫试剂盒
芽胞杆菌载脂蛋白D抗体Human KIF1B 小鼠神经营养因子3(NT-3)免疫试剂盒
酿酒酵母丁酰基合成3抗体Human KIF1C 小鼠神经型一氧化氮合成(nNOS/NOS1)免疫试剂盒
黄溶链霉菌脂肪源性亮基肽抗体(血管内皮生长因子诱导蛋白)Human KIF19 小鼠神经粘附分子1(NCAM1)免疫试剂盒
大豆慢生根瘤菌线粒体凋亡诱导因子2抗体Human KIF20A 小鼠神经特异性烯化(NSE)免疫试剂盒
食砜节杆菌ABL2蛋白抗体Human KIF26B 小鼠神经肽Y(NPY)免疫试剂盒
糖多孢菌血管紧张转换ACE1抗体Human KIF22 小鼠神经丝蛋白L(NF-L)免疫试剂盒
黑根霉血管紧张转换2抗体Human KIF2B 小鼠神经生长因子前体(proNGF)免疫试剂盒
大豆慢生根瘤菌Acinus抗体Human KIF2C 小鼠神经生长因子(NGF)免疫试剂盒
副猪嗜血杆菌醋激1抗体Human KIF2A 小鼠神经胶质纤维性蛋白(GFAP)免疫试剂盒
枯草芽孢杆菌Bacillus│subtilis 质量规格:>98%,BS白介37试剂盒新对叶百部碱
: ATCC12291资源名称: 假肠膜明串珠菌 质量规格:>97%,BR白介35试剂盒小芸木
大肠埃希菌Escherichia│coli 质量规格:>98%,BR白介33试剂盒莶精
硼酸洋红染色液松杉灵芝 4'-溴乙酰苯肌动蛋白抗体IgA
枯草芽孢杆 3,5-二-4-氟苯肾上腺髓质前体
相思根瘤 2,5-二氟-4-甲结构特异性核FEN1
类芽孢杆属 (R)-(+)-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-羧狂犬病IgM抗体
枯草芽孢杆 反式-2-溴-1-茚维生D结合蛋白
高地芽胞杆 没食子十八酯狂犬病IgG抗体
耐冷冷杆 异丁(2-苯氧乙基)酯IgG Fc片段
链霉 喹啉-6-羧登革热病IgG抗体
黄皮疣柄牛肝 1,4-氧代氮杂烷-5-酮登革热病IgM抗体
篱边粘褶 N-(苯氧基异基)乙Vasorin蛋白
绿色木霉=木木霉 促进剂DTDMT 钙粘蛋白
暗孢节菱孢 3-苯甲酯白介1受体样1
韩国梅奇酵母 1-苄基-4-甲甲酯周期依赖性激1
金龟子绿僵 2-乙基乙己酯骨骼肌受体酪激
短芽胞杆 1-溴-3,5二苯基苯甲羟戊激
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
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