细胞脂质染色试剂盒1000T使用说明书实验操作步骤:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量为 1mL ,其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推;对于细胞悬液每50~100 万细胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取适量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超纯水的比例稀释JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色缓冲液(5 ×),混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、阳性对照的设置:
把试剂盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到细胞培养液中,稀释至10uM ,处理细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ,进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞,通常10uM CCCP处理 20 分钟后线粒体的膜电位会*丧失,JC-1 染色后观察应呈绿色荧光;而正常的细胞经JC-1 染色后应显示红色荧光。对于特定的细胞,CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同,需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞:
(1)取 10~60 万细胞,重悬于 0.5mL 细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中 37 ℃孵育20 分钟。
(3)在孵育期间,按照每 1mL JC-1 染色缓冲液(5×)加入 4mL 蒸馏水的比例,配制适量的JC-1 染色缓冲液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育结束后,600g 4 ℃离心3 ~4 分钟,沉淀细胞。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。
(5)用JC-1 染色缓冲液(1×)洗涤 2 次:加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。再加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心 3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。
(6)再用适量 JC-1 染色缓冲液(1×)重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
细胞脂质染色试剂盒1000T使用说明书注意事项
(1)本试剂只适用于实验,不适用于临床检测;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙锭)有毒性,能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用,使用时需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。在处理和标记时,尽可能在暗处进行。在孵育阶段,用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后,在暗室内用显微镜观察;
(4)整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作,以免影响细胞状态。
(5)在细胞洗涤的后一步,请尽量将上清弃净,以免PBS残留,有可能会影响实验结果。
(6)为防止荧光衰变,宜在1小时内进行流式检测。
(7)PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,建议首*行Annexin V-FITC染色,短可在上机前5分钟再加入PI染色。
PC-3M(人前列腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2
人真皮微血管内皮细胞总RNAHDMEC tRNA
REG1B Others Cynomolgus 食蟹猴 REG1B / PSPS2 人细胞裂解液 (阳性对照)
MDA-MB-435S细胞,人癌细胞 鼠成纤维细胞系,GR细胞 原代神经元细胞特制基础无血清培养基Many types of cells包装:500/100ml
CL-0318B16-F1(小鼠黑色素瘤细胞)5×106cells/瓶×2
HCAEC Pellet 人冠状动脉内皮细胞团块 > 1 mio.cells 口腔角质细胞生长添加物OKGS
小鼠树突状细胞肉瘤低转移细胞(VAP33-GFP融合蛋白稳定过表达);DG6-VAP33-GFP
GP1BB Others Rat 大鼠 GP1BB / CD42c 人细胞裂解液 (阳性对照)
原代骨细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装:1ml
ECV-304细胞,人脐静脉内皮细胞 铜绿假单胞杆菌(绿脓杆菌) 人真皮成纤维细胞-总RNAHDF-a tRNA
R 1610(仓鼠肺细胞) 5×106cells/瓶×2
ES-2(人卵巢透明细胞癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0263BGC-803(人胃癌细胞)5×106cells/瓶×2 猫肾细胞;F81
F13B Others Human 人 F13B / Coagulation factor XIII B chain 人细胞裂解液 (阳性对照)
人淋巴成纤维细胞RNAHLF miRNA5 μg
U251 人神经胶质瘤细胞
CL-0426RKO-E6(人结肠癌转基因细胞)5×106cells/瓶×2
人星形胶质细胞
人胚肺二倍体细胞;HL 人小肠粘膜上皮细胞*培养基 100mL
大鼠血沉(ESR)elisa试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)免疫试剂盒 Human ICAM-2 ELISA Kit
基酸(AA)含量测试盒 可见分光光度法 50管/48样
Ratoxidizedlowdensitylipoproteinantibody,OLAbELISA试剂盒大鼠氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Humanhypoxia-induciblefactor1α,HIF-1αELISA试剂盒人低氧诱导因子1α(HIF-1α)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanMatrixGlaProtein,MGPELISAKit人基质γ羧基*蛋白(MGP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
小鼠11β羟基类固醇脱氢酶(11β-HSD)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human gastrin cell antibody (GCA) ELISA Kit 人胃泌素细胞抗体(GCA)ELISA试剂盒
PorcinePrednisoloneELISAKit 猪*龙(Prednisolone)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanCpGoligodeoxynucleotide,CpG-ODNELISA试剂盒人未甲基化寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织COT激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
HumanProteinCarbonyl,PCELISAKit人羰基化蛋白(PC)ELISA试剂盒规格:96T/48T
细胞脂质染色试剂盒1000T使用说明书人抗利尿激素/血管加压素/精酸加压素(ADH/VP/AVP)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人抗类固醇细胞抗体(SCA)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人抗类风湿关节炎核抗原抗体(RANA)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人抗狂犬病毒抗体(anti-RV)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
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