福尔根染色液(Feulgen Stain)3x50ml实验方法使用注意事项
1.微量试剂取用前请离心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿*、戴手套等。
4.本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不*用于检测组织样本。
福尔根染色液(Feulgen Stain)3x50ml实验方法操作方法
1.悬浮细胞离心(2000rpm离心5min)收集;贴壁细胞用*消化收集用PBS洗涤细胞二次(2000rpm离心5min)收集1~5×105细胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混匀;室温、避光、反应5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞;
4.请在1 hour内,进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A.荧光显微镜观察
1.滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上,并用盖玻片盖上细胞;
2.对于贴壁细胞来说,也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡;
(1)将细胞于盖玻片上生长,用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡,并设立阴性对照组;
(2)用PBS洗涤细胞两次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混匀;
(4)将上述溶液滴加于盖玻片表面,使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖;
(5)避光、室温反应5 min。
3.将盖玻片倒置于载玻片上,于荧光显微镜下观察激发波长546nm,发射波长647 nm,7-AAD荧光信号呈红色。
B.流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测,激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
福尔根染色液(Feulgen Stain)3x50ml实验方法实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的*消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2%的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的*消化时,注意必须*清除EDTA:在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤,清除EDTA,以免残余的EDTA与Ca2+螯合,影响Annexin V的结合。
(1)用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer;
(2)细胞收集。悬浮细胞收集:离心5分钟;贴壁细胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化时间不宜过长,否则会影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合),于室温2000rpm离心5~10分钟,收集细胞;
(3)细胞洗涤:用预冷1×PBS(4℃)重悬细胞一次,2000rpm离心5~10分钟,洗涤细胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞;
(5)Annexin V-FITC标记:加入5μL的Annexin V-FITC混匀后,避光,室温孵育15分钟;
(6)PI标记:上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
(7)上机前,补加200μL的1×Binding Buffer。
SMC-1(人胸膜瘤细胞) 5×106cells/瓶×2
人脉络丛内皮细胞总RNAHCPEC tRNA
PDGFRB Others Rat 大鼠 PDGFRB / PDGFR-1 人细胞裂解液 (阳性对照)
MDA-MB-453细胞,人导管癌细胞 鼠细胞系,B82细胞 膀胱平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
CL-0305SF-295(人XG恶性胶质瘤细胞)5×106cells/瓶×2
HPAEC Pellet 人肺动脉内皮细胞团块 > 1 mio.cells 心肌细胞生长添加物CMGS
人心肌成纤维细胞-心房RNAHCF-aa miRNA5 μg
GOLM1 Others Human 人 GOLM1 / GP73 人细胞裂解液 (阳性对照)
P3X63Ag8 小鼠骨髓瘤细胞
小鼠骨髓间充质干细胞(EGFP标记)
小鼠皮层神经胶质细胞(EGFP标记)
人胚胎肺成纤维细胞;WI-38 人肠微血管内皮细胞*培养基 100mL
CLEC4D Others Rat 大鼠 CLEC4D / CLECSF8 人细胞裂解液 (阳性对照)
人淋巴内皮细胞cDNAHLEC cDNA
杂交瘤(B类);Z1510A2G6A2F8
Bel-7404细胞,人肝癌细胞 人皮肤成纤维细胞,CCC-HSF-1细胞 中国仓鼠卵巢细胞;CHO
L1210(小鼠白血病细胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-28012 Mesenchymal Stem CellChondrogenic Different. Medium, 间充质干细胞软骨分化培养基(即用型) 100ml
大鼠溴脱氧核苷*(BrdU)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)免疫试剂盒 Human ICAM-1 ELISA Kit
半胱酸(Cys)含量测试盒 可见分光光度法 50管/48样
Ratoxidizedlowdensitylipoprotein,OxLDLELISA试剂盒大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanICEprotease-activatingfactor,IRAPELISA试剂盒人ICE蛋白酶激活因子(IRAP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanMatrixmetalloproteinase1,MMP-1ELISAKit人基质金属蛋白酶1(MMP-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
小鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human gastric inhibitory polypeptide (GIP) ELISA Kit 人胃抑素(GIP)ELISA试剂盒
Humancomplexedprostatespecificantigen,cPSAELISAKit 人复合前列腺特异性抗原(CPSA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanC-ReactiveProtein,CRPELISA试剂盒人C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织CSK激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
HumanProtamine1,PRM1ELISAKit人*1(PRM1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
福尔根染色液(Feulgen Stain)3x50ml实验方法人抗盐抵抗的酸性磷酸酶(TRAP)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人抗酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人抗抗体(AsAb)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人抗结核杆菌(TB-Ab)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装