细胞糖蛋白染色试剂盒100T售后服务使用注意事项
1.微量试剂取用前请离心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿*、戴手套等。
4.本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不*用于检测组织样本。
细胞糖蛋白染色试剂盒100T售后服务操作方法
1.悬浮细胞离心(2000rpm离心5min)收集;贴壁细胞用*消化收集用PBS洗涤细胞二次(2000rpm离心5min)收集1~5×105细胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混匀;室温、避光、反应5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞;
4.请在1 hour内,进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A.荧光显微镜观察
1.滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上,并用盖玻片盖上细胞;
2.对于贴壁细胞来说,也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡;
(1)将细胞于盖玻片上生长,用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡,并设立阴性对照组;
(2)用PBS洗涤细胞两次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混匀;
(4)将上述溶液滴加于盖玻片表面,使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖;
(5)避光、室温反应5 min。
3.将盖玻片倒置于载玻片上,于荧光显微镜下观察激发波长546nm,发射波长647 nm,7-AAD荧光信号呈红色。
B.流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测,激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
细胞糖蛋白染色试剂盒100T售后服务实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的*消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2%的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的*消化时,注意必须*清除EDTA:在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤,清除EDTA,以免残余的EDTA与Ca2+螯合,影响Annexin V的结合。
(1)用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer;
(2)细胞收集。悬浮细胞收集:离心5分钟;贴壁细胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化时间不宜过长,否则会影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合),于室温2000rpm离心5~10分钟,收集细胞;
(3)细胞洗涤:用预冷1×PBS(4℃)重悬细胞一次,2000rpm离心5~10分钟,洗涤细胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞;
(5)Annexin V-FITC标记:加入5μL的Annexin V-FITC混匀后,避光,室温孵育15分钟;
(6)PI标记:上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
(7)上机前,补加200μL的1×Binding Buffer。
SW1116(人结肠腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2
成纤维细胞cDNAHMF cDNA
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HBL-100细胞,人细胞 兔肾细胞系,RK-13细胞 表皮角化细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
CL-0296MX-1(人癌细胞)5×106cells/瓶×2
HSaVEC Pellet 人隐静脉内皮细胞团块 > 1 mio.cells 间充质干细胞脂肪细胞分化生长添加物MADS
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-A2
GM2A Others Human 人 GM2A 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
CM-M057小鼠肾系膜细胞*培养基100mL
WM35, 人黑色素瘤细胞 神经母细胞瘤细胞,M17细胞 PC-12分化(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤)
小鼠肝癌细胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6]
IL10RB Others Human 人 IL10Rb 人细胞裂解液 (阳性对照)
CDH17 Others Rat 大鼠 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 人细胞裂解液 (阳性对照)
人淋巴内皮细胞HLEC
大鼠肝窦内皮细胞*培养基 100mL
293T/17人胚肾细胞 Human embryonic kidney cell line 293T/17 DMEM+10%FBS
FGF19 Protein Human 重组人 FGF19 蛋白
BEL-7405(人肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2 人真皮成纤维母细胞-新生HDF-n
大鼠金属硫蛋白(MT)ELISA试剂盒 ,英文名: MT ELISA Kit
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CLIAKitforNF-KapBp65(Rabbitnuclearfactor-KapBp65)ELISAKit兔核因子κB亚基p65亲和肽规格:48T/96T
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