我司细胞膜染色试剂 Deep Red Dye 500ul实验方法本着标准*、质量*、服务*、信誉*的宗旨,为客户提供轻松便捷,安全可靠的网上采购模式!我们将竭诚为您服务,咨询!
细胞膜染色试剂 Deep Red Dye 500ul实验方法实验操作步骤:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量为 1mL ,其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推;对于细胞悬液每50~100 万细胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取适量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超纯水的比例稀释JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色缓冲液(5 ×),混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、阳性对照的设置:
把试剂盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到细胞培养液中,稀释至10uM ,处理细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ,进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞,通常10uM CCCP处理 20 分钟后线粒体的膜电位会*丧失,JC-1 染色后观察应呈绿色荧光;而正常的细胞经JC-1 染色后应显示红色荧光。对于特定的细胞,CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同,需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞:
(1)取 10~60 万细胞,重悬于 0.5mL 细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中 37 ℃孵育20 分钟。
(3)在孵育期间,按照每 1mL JC-1 染色缓冲液(5×)加入 4mL 蒸馏水的比例,配制适量的JC-1 染色缓冲液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育结束后,600g 4 ℃离心3 ~4 分钟,沉淀细胞。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。
(5)用JC-1 染色缓冲液(1×)洗涤 2 次:加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。再加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心 3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。
(6)再用适量 JC-1 染色缓冲液(1×)重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
细胞膜染色试剂 Deep Red Dye 500ul实验方法注意事项
(1)本试剂只适用于实验,不适用于临床检测;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙锭)有毒性,能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用,使用时需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。在处理和标记时,尽可能在暗处进行。在孵育阶段,用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后,在暗室内用显微镜观察;
(4)整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作,以免影响细胞状态。
(5)在细胞洗涤的后一步,请尽量将上清弃净,以免PBS残留,有可能会影响实验结果。
(6)为防止荧光衰变,宜在1小时内进行流式检测。
(7)PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,建议首*行Annexin V-FITC染色,短可在上机前5分钟再加入PI染色。
VE(人血管内皮细胞) 5×106cells/瓶×2
人心肌细胞cDNAHCM cDNA
NTRK1 Others Mouse 小鼠 TrkA / NTRK1 人细胞裂解液 (阳性对照)
MX-1细胞,人癌细胞 猪肾细胞系,PK-15细胞 大隐静脉平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
CL-0269CW-2(人结肠癌细胞)5×106cells/瓶×2
HUtMEC Pellet 人子宫微血管内皮细胞团块 > 1 mio.cells 肌细胞分离液MDS
淋巴成纤维细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
GLA Others Mouse 小鼠 alpha-Galactosidase A / GLA 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠大隐静脉平滑肌细胞*培养基 100mL
GP-293人胚肾细胞 Human embryonic kidney cell line GP-293 DMEM+10% FBS
IFNA13 Protein Mouse 重组小鼠 IFNA13 / Interferon alpha-13 蛋白 (His 标签)
HOS(人骨肉瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 非01群霍乱弧菌
IL2RA Others Cynomolgus 食蟹猴 IL2RA 人细胞裂解液 (阳性对照)
人颅骨造骨细胞裂解物HCOL
小鼠淋巴瘤细胞;EL4
LX-2细胞,人肝星形细胞正常 人胚胎眼巩膜成纤维细胞,HFSF细胞 家猫肺细胞;FCA-L2
LoVo(人大肠癌细胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-21110 Mammary Epithelial Cell GrowthMedium KIT, 上皮细胞生长培养基套装 500ml
大鼠性激素结合球蛋白(SHBG)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人细胞毒素相关蛋白A(CagA)免疫试剂盒 Human Cytotoxin-associated protein,CagA ELISA Kit
乙酰*酯酶(AchE)测试盒 可见分光光度法 50管/48样
RatParathyroidHormoneRelatedProtein,PTHrPELISA试剂盒大鼠甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanImmuneRNA,IrnaELISA试剂盒人免疫核糖核酸(Irna)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanMatrixmetalloproteinase13,MMP-13ELISAKit人基质金属蛋白酶13(MMP-13)ELISA试剂盒规格:96T/48T
豚鼠主要组织相容性复合体(MHC/GPLA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Neonatal rat thyroxine (NN-T4) ELISA Kit 大鼠新生甲状腺素(NN-T4)ELISA试剂盒
Humangrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISAKit 人生长激素释放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanCrosslaps,CrELISA试剂盒人骨胶原交联(Cr)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织DYRK1A激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
humanProstaglandinF,PG-FELISAKit人前列腺素F(PGF)ELISA试剂盒规格:96T/48T
细胞膜染色试剂 Deep Red Dye 500ul实验方法人抗核周因子抗体(APF)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人抗核因子抗体(ANF)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人抗核小体抗体IgG(AnuA-IgG)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人抗核糖体P蛋白抗体(ARPA/Rib-P)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装