二氧化氮(NO2)检测试剂盒100T免费代测使用注意事项
1.微量试剂取用前请离心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿*、戴手套等。
4.本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不*用于检测组织样本。
二氧化氮(NO2)检测试剂盒100T免费代测操作方法
1.悬浮细胞离心(2000rpm离心5min)收集;贴壁细胞用*消化收集用PBS洗涤细胞二次(2000rpm离心5min)收集1~5×105细胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混匀;室温、避光、反应5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞;
4.请在1 hour内,进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A.荧光显微镜观察
1.滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上,并用盖玻片盖上细胞;
2.对于贴壁细胞来说,也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡;
(1)将细胞于盖玻片上生长,用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡,并设立阴性对照组;
(2)用PBS洗涤细胞两次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混匀;
(4)将上述溶液滴加于盖玻片表面,使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖;
(5)避光、室温反应5 min。
3.将盖玻片倒置于载玻片上,于荧光显微镜下观察激发波长546nm,发射波长647 nm,7-AAD荧光信号呈红色。
B.流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测,激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
二氧化氮(NO2)检测试剂盒100T免费代测实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的*消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2%的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的*消化时,注意必须*清除EDTA:在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤,清除EDTA,以免残余的EDTA与Ca2+螯合,影响Annexin V的结合。
(1)用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer;
(2)细胞收集。悬浮细胞收集:离心5分钟;贴壁细胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化时间不宜过长,否则会影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合),于室温2000rpm离心5~10分钟,收集细胞;
(3)细胞洗涤:用预冷1×PBS(4℃)重悬细胞一次,2000rpm离心5~10分钟,洗涤细胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞;
(5)Annexin V-FITC标记:加入5μL的Annexin V-FITC混匀后,避光,室温孵育15分钟;
(6)PI标记:上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
(7)上机前,补加200μL的1×Binding Buffer。
P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠骨髓瘤细胞) 5×106cells/瓶×2
肝动脉内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
ACVR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人细胞裂解液 (阳性对照)
Hurt-78细胞,人T细胞淋巴瘤 小鼠胚胎成纤维细胞,3T3-swiss albino细胞 人肺泡上皮细胞cDNAHPAEpiC cDNA
正常大鼠肾细胞;NRK
COS-1(非洲绿猴SV40转化的肾细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0174NRK-52E(大鼠肾小管导管上皮细胞)5×106cells/瓶×2 大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞;RBL-2H3
CM-R028大鼠食管平滑肌细胞*培养基100mL
FAM3B Others Human 人 FAM3B 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠成年表皮角质形成层细胞*培养基 100mL
YAC-1小鼠淋巴瘤细胞 YAC-1 mouse lymphoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
IL17RD Protein Canine 重组狗 IL17RD 蛋白 (His 标签)
人脉络丝表皮细胞 (HCPEpiC)( 5×105 ) 人脐带血单个核细胞 Saos-2,人成骨肉瘤细胞
IL20RB Others Rat 大鼠 IL20RB 人细胞裂解液 (阳性对照)
人胚胎心脏成纤维样细胞;HEH2
人肾皮层上皮细胞*培养基 100mL
B16-Fo细胞,鼠黑色素瘤细胞系 WI-38(胚肺细胞) 人晶体上皮细胞永生系;SRA01/04(HLE)
CCL8 Protein Mouse 重组小鼠 CCL8 / MCP-2 蛋白 (His & NusA 标签)
SGC7901(人胃癌细胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 HER2 / ErbB2 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠碳酸酐酶2(CA-2)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人脱氢表雄酮(DHEA)免疫试剂盒 Human Dehydroepiandrosterone,DHEA ELISA Kit
动植物组织葡萄糖含量测试盒 可见分光光度法 50管/48样
RatsolubleE-selectin,sE-selectinELISA试剂盒大鼠可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanInterleukin-2receptor,IL-2RELISA试剂盒人白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Humanmyosinheavychain,MHCELISAKit人肌球蛋白重链(MHC)ELISA试剂盒规格:96T/48T
兔子睾酮(T)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human androgen receptor (AR) ELISA Kit 人雄激素受体(AR)ELISA试剂盒
Mouseanti-thyroid-globulinantibody,TGABELISAKit 小鼠抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanEotaxin1ELISA试剂盒人嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织PKG-I激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
Humanpancreatickininogenase,PKELISAKit人*(PK)ELISA试剂盒规格:96T/48T
二氧化氮(NO2)检测试剂盒100T免费代测人白介素5(IL-5)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人白介素4(IL-4)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人白介素35(IL-35)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人白介素33(IL-33)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装