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ROS活性氧抑制剂 / ROS清除剂5ml售后服务实验操作步骤:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量为 1mL ,其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推;对于细胞悬液每50~100 万细胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取适量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超纯水的比例稀释JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色缓冲液(5 ×),混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、阳性对照的设置:
把试剂盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到细胞培养液中,稀释至10uM ,处理细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ,进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞,通常10uM CCCP处理 20 分钟后线粒体的膜电位会*丧失,JC-1 染色后观察应呈绿色荧光;而正常的细胞经JC-1 染色后应显示红色荧光。对于特定的细胞,CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同,需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞:
(1)取 10~60 万细胞,重悬于 0.5mL 细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中 37 ℃孵育20 分钟。
(3)在孵育期间,按照每 1mL JC-1 染色缓冲液(5×)加入 4mL 蒸馏水的比例,配制适量的JC-1 染色缓冲液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育结束后,600g 4 ℃离心3 ~4 分钟,沉淀细胞。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。
(5)用JC-1 染色缓冲液(1×)洗涤 2 次:加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。再加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心 3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。
(6)再用适量 JC-1 染色缓冲液(1×)重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
ROS活性氧抑制剂 / ROS清除剂5ml售后服务注意事项
(1)本试剂只适用于实验,不适用于临床检测;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙锭)有毒性,能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用,使用时需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。在处理和标记时,尽可能在暗处进行。在孵育阶段,用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后,在暗室内用显微镜观察;
(4)整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作,以免影响细胞状态。
(5)在细胞洗涤的后一步,请尽量将上清弃净,以免PBS残留,有可能会影响实验结果。
(6)为防止荧光衰变,宜在1小时内进行流式检测。
(7)PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,建议首*行Annexin V-FITC染色,短可在上机前5分钟再加入PI染色。
PA-1(人卵巢腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2
肺大静脉平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
IL23R Others Rat 大鼠 IL23R / IL23 Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照)
Molt-4细胞,人T淋巴细胞(白血病CD8+) 小鼠胰腺腺泡细胞癌细胞,MPC-83细胞 人尿道上皮细胞cDNAHUC cDNA
大鼠肺泡巨噬细胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1]
CRFK(猫肾细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0190RAW 264.7(小鼠单核巨噬细胞白血病细胞)5×106cells/瓶×2 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞;PC-12 [PC12]
CL-0226SW626(人卵巢癌细胞)5×106cells/瓶×2
FAM19A4 Others Human 人 FAM19A4 / TAFA4 人细胞裂解液 (阳性对照)
人牙龈成纤维细胞cDNAHGF cDNA
猪胚胎传代细胞;ST 子细胞,SiHa细胞 B22细胞,KM小鼠未分化神经胶质瘤瘤株
Sars结构蛋白表达株;293sars181A
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照)
EPHB1 Others Mouse 小鼠 EPHB1 / EPHT2 人细胞裂解液 (阳性对照)
人胚胎眼巩膜成纤维细胞;HFSF
NCI-N87 人高分化胃癌细胞
RLF, 大鼠淋巴成纤维细胞
人间充质干细胞-肝
人胚胎,皮肤,肌肉;M-7 人脐带单核细胞*培养基 100mL
大鼠碳酸酐酶(CA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人脱-γ-羧基*原(DCP)免疫试剂盒 Human des-gamma-carboxy-prothrombin,DCP ELISA Kit
植物可溶性糖含量测试盒 可见分光光度法 50管/48样
RatsolubleFactor-relatedApoptosis,sFAS/Apo-1ELISA试剂盒大鼠可溶性凋亡相关因子(sFAS/Apo-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Humanintestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISA试剂盒人肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Humanmyosinlightchainkinase,MLCKELISAKit人肌球蛋白轻链激酶(MLCK)ELISA试剂盒规格:96T/48T
兔子肝细胞生长因子(HGF)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human bromodeoxyuridine (BrdU) ELISA Kit 人溴脱氧核苷*(BrdU)ELISA试剂盒
Humanrheumatoidarthritisassociatednuclearartigen,RANAELISAKit 人抗类风湿关节炎核抗原抗体(RANA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanepidermalbasementmembranezone,EBMZELISA试剂盒人抗表皮细胞基底膜抗体(EBMZ)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织PLK1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
HumanPancreaticcarcinomamarkers-CA242ELISAKit人胰腺癌标志物CA242ELISA试剂盒规格:96T/48T
ROS活性氧抑制剂 / ROS清除剂5ml售后服务人白介素27(IL-27)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人白介素26(IL-26)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人白介素24(IL-24)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人白介素23(IL-23)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装