Ro31-8220甲磺酸盐是广谱PKC抑制剂正在热销的产品：IL-16(Human Interleukin 16) ELISA KIT 人白介162-苯-2- 97%
IL-13(Human Interleukin 13) ELISA KIT 人白介13苯酯 99%
IL-12/P70(Human Interleukin 12) ELISA KIT 人白介12棕榈油 98.5%
IL-11(
培养操作步骤：
1．公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
英文名称：Ro 31-8220 mesylate
产品规格：1mL(10mM)|10mg|50mg
货号：FS-X10711
产品介绍:
Ro31-8220(Bisindolylmaleimide IX)甲磺酸盐是广谱PKC抑制剂，对PKC-α，PKC-βI，PKC-βII，PKC-γ和PKC-ε的IC50分别为5nM，24nM，14nM，27nM和24nM。 注：本品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他用途！ 号：138489-18-6 别名：Ro 31-8220 methanesulfonate;Bisindolylmaleimide IX mesylate 纯度：99.50% 分子量：553.65 储存条件：-20℃，有效期2年，溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。 |
实验报告：
一、分离与培养： 1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小； 2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置； 3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化； 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养； 5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养； | 二、免疫荧光鉴定： 1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min； 2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min； 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜； 5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h； 6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
动性球菌磷脂酰基蛋白聚糖-3(多肽)Anti-CMTM3 Antibody人γ干扰诱导单核因子(MIGF/CXCL9)
假单胞菌磷脂酰基蛋白聚糖-4抗原Anti-CMTM5 Antibody人γ干扰诱导单核因子(MIGF/CXCL9)
浅黄链霉菌生长因子受体结合蛋白2抗原Anti-CMTM6 Antibody人干扰诱导T趋化因子(ITAC/CXCL11)
宇佐美曲霉颗粒B抗原Anti-CMTM6 Antibody人干扰诱导T趋化因子(ITAC/CXCL11)
高羊肚菌G蛋白偶联受体14抗原Anti-CMTM8 Antibody人CD14分子(CDl4)
膨大弯颈霉G蛋白偶联受体30抗原Anti-CNGA1 Antibody人CD14分子(CDl4)
秦氏蜜环菌促性腺激释放激受体抗原Anti-CNGA1 Antibody人凋亡诱导因子(AIF)
巨型艾美耳球虫G蛋白偶联受体54抗原Anti-CNGA1 Antibody人凋亡诱导因子(AIF)
巨枝膝梗霉G蛋白偶合受体激2抗原Anti-CNGA2 Antibody人白共同抗原(LCA/CD45)
麦根腐平脐蠕孢促代谢型谷受体2抗原Anti-CNKSR1 Antibody人白共同抗原(LCA/CD45)
乳片球菌生长调节致癌基因α/黑瘤生激因子α 抗原Anti-CNGA2 Antibody人CD4分子(CD4)
中国台湾根霉葡萄糖调节蛋白78抗原（热休克蛋白70蛋白5）Anti-CNKSR1 Antibody人CD4分子(CD4)
灵芝还原抗原Anti-CNKSR2 Antibody人P钙黏蛋白/胎盘钙黏蛋白(P-cad)
弯孢菌A型人流感病H1N1-M2蛋白多肽Anti-CNKSR2 Antibody人P钙黏蛋白/胎盘钙黏蛋白(P-cad)
盐水海杆状菌A型猪流感病H1N1-M2蛋白Anti-CNN2 Antibody人角化生长因子(KGF)
白地霉流感病A抗原Anti-CNOT4 Antibody人角化生长因子(KGF)
蛋白体PSMα1抗体假结核耶尔森氏菌大鼠骨骼肌成肌细胞
蛋白体PSMα2抗体小肠结肠炎耶尔森氏菌人正常卵巢上皮细胞
蛋白体PSMα6抗体缺陷短波单胞菌类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞
蛋白体PSMα7抗体乳片球菌牛子宫内膜上皮细胞
Ro31-8220甲磺酸盐是广谱PKC抑制剂Xenorhabdus 乙酰氧肟皮质
黄曲霉 二巯基马来二钠皮质酮;肾上腺酮
草青霉 八苯基环四硅氧烷前列环
胶孢 N-（3-溴基）邻苯二甲酰亚前列腺E2
酿酒酵母 2,6-吡啶二甲二甲酯
假单胞 1-溴-5-戊烷去甲肾上腺
流散隐球酵母 2-甲酯全段甲状旁腺
拟可可毛球二孢 α-溴肉桂固酮
杏鲍菇 溴乙苄酯状腺原
谷棒杆 3-甲基-2-甲三叶因子3
四川散斑壳 4,4-二甲氧基-2-丁酮神经肽Y
嗜热脂肪芽孢杆 4-氨基苯二甲神经元烯化
热带假丝酵母 2-氨基-5-嘧啶肾
蜡叶曲霉 代环己烷肾损伤分子1
酒色青霉 1,3-酮二羧生长分化因子15
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
