原代细胞生长周期和传代比例2017/6/27

原代细胞体外培养技术中所谓的传“代”概念并不等于细胞生物学中“亲代细胞”与“子代细胞”中“代”的概念。传代培养的实质就是分离后再次培养，进行一次分离再培养称之为传一代，传代数可以衡量培养物的培养年龄。...

关于ATCC细胞消化2017/6/22

一、ATCC细胞酶消化法1.胰酶。这是用得Z多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大，从几分钟到几十分钟不等。0.25%的胰酶作用于单层贴壁的细胞，在37度条...

对于支原体污染的细胞可以采取补救措施2017/6/20

1.细胞系抗生素排除法：可以用5-10倍于常用量的冲击法，加入高浓度抗生素后作用24-48小时，再换入常规培养液，有时可能有效。推荐用量：庆大霉素200ug/ml,四环素10ug/ml，卡那霉素50u...

原代细胞污染处理流程2017/6/15

原代细胞污染处理流程1、将污染的培养液倒掉，转烧瓶口，加入10mlPBS，适当晃动清洗培养瓶，然后倒掉。转烧瓶口。2、继续加入10mlPBS，同样方法晃动，清洗培养瓶，然后倒掉。3、继续加入5mlPB...

实验中细胞爬片的免疫荧光操作步骤2017/6/13

1.取出ATCC细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里，PBS洗三遍。注意：有的时候作的细胞爬片可能比较小，因此夹取的时候要小心，注意反正面，放在皿里洗比较方便，避免了来回夹取，另外洗的时候...

ATCC细胞迁移分析2017/6/8

ATCC细胞自动定时摄影记录显示,培养细胞可在附着面上运动,低细胞密度情况下,成纤维细胞的迁移能力Z强（细胞间不发生接触）,密集的单层上皮细胞迁移能力Z弱.成纤维细胞以可辨的极性运动方式进行个体移动,...

ATCC细胞培养时玻璃器皿的清洗步骤2017/6/6

ATCC细胞玻璃器皿的清洗步骤：按浸泡→刷洗→浸酸→冲洗等四步程序进行。①浸泡：新购进的玻璃器皿常带有灰尘，呈弱碱性，或带有铅、碑等有害物质，故先用自来水浸泡过夜、水洗，然后再用2%~5%盐酸浸泡过夜...

ATCC细胞破碎的技术分析2017/6/1

ATCC细胞破碎技术是指利用外力破坏细胞膜和细胞壁，使细胞内容物包括目的产物成分释放出来的技术，是分离纯化细胞内合成的非分泌型生化物质（产品）的基础。结合重组DNA技术和组织培养技术上的重大进展，以前...

细胞培养支原体直接培养法2017/5/25

ATCC细胞原理：直接培养支原体于培养基中，观察其生长及菌落生成特点：是目Z直接与灵敏之步骤，亦是用来评估其它侦测新步骤之标准步骤。缺点：培养时间长，须3－5星期才能判断。有些支原体不能在培养基培养出...

细胞系涂片组织标本的制备操作步骤2017/5/23

活检组织样品染色可以进行细胞系涂片，如针吸活检组织、组织刮片或新鲜切割组织：此时，将一薄层的细胞以物理方法固着在洁净的载玻片上。要想取得理想的染色效果，Z重要的因素是涂成单层细胞。涂片虽不能保持组织结...

细胞的结构详解2017/5/18

1.细胞壁（CellWall）ATCC细胞位于植物细胞的Z外层,是一层透明的薄壁。它主要是由纤维素和果胶组成的，孔隙较大，物质分子可以自由透过。细胞壁对细胞起着支持和保护的作用。2.细胞膜（CellM...

ATCC细胞在体外培养中所需的条件2017/5/16

1、ATCC细胞无污染环境培养环境无毒和无菌是保证细胞生存的首要条件。当细胞放置于体外培养时，与体内相比细胞丢失了对微生物和有毒物的防御能力，一旦被污染或自身代谢物质积累等，可导致细胞死亡。因此在进行...

原代细胞传代培养的操作介绍2017/5/9

1.观察培养基是否正常，原代细胞状态如何，细胞密度如何，决定是否传代。观察时拧紧盖子。2.加热PBS、versene、培养基，(提前做好)瓶子不要倒着放，不要让液体接触到瓶塞。3.打开超净台(先开风机...

分析原代细胞培养基的缓冲系统选择及pH变化问题2017/5/4

由于大多数原代细胞适宜的pH为7.0~7.4，偏离此范围可能对细胞生长将产生有害的影响。但各种细胞对pH的要求也不*相同，原代培养的细胞一般对pH变动耐受力差，无限细胞系耐受力强。因此，原代培养时，培...

ATCC细胞血清培养方法2017/4/27

ATCC细胞的培养都是在DMEM/F12基础培养基中添加5~10的小牛血清(用于重组蛋白)或胎牛血清(用于杂交瘤)单抗来完成的，血清除了供给细胞的营养成分外，还能促进细胞开始合成DNA，对细胞的增殖有...