瑞氏染色液(即用型)500ml实验方法储存条件: 室温密封保存。
有效期: 一年。
产品简介:
瑞氏染色液(即用型)是采用优质试剂原料和经典配方配制,主要用于血液和骨髓涂片、细菌等染色。
瑞氏染色液(即用型)500ml实验方法实验操作步骤:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量为 1mL ,其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推;对于细胞悬液每50~100 万细胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取适量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超纯水的比例稀释JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色缓冲液(5 ×),混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、阳性对照的设置:
把试剂盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到细胞培养液中,稀释至10uM ,处理细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ,进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞,通常10uM CCCP处理 20 分钟后线粒体的膜电位会*丧失,JC-1 染色后观察应呈绿色荧光;而正常的细胞经JC-1 染色后应显示红色荧光。对于特定的细胞,CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同,需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞:
(1)取 10~60 万细胞,重悬于 0.5mL 细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中 37 ℃孵育20 分钟。
(3)在孵育期间,按照每 1mL JC-1 染色缓冲液(5×)加入 4mL 蒸馏水的比例,配制适量的JC-1 染色缓冲液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育结束后,600g 4 ℃离心3 ~4 分钟,沉淀细胞。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。
(5)用JC-1 染色缓冲液(1×)洗涤 2 次:加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。再加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心 3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。
(6)再用适量 JC-1 染色缓冲液(1×)重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
瑞氏染色液(即用型)500ml实验方法注意事项
(1)本试剂只适用于实验,不适用于临床检测;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙锭)有毒性,能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用,使用时需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。在处理和标记时,尽可能在暗处进行。在孵育阶段,用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后,在暗室内用显微镜观察;
(4)整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作,以免影响细胞状态。
(5)在细胞洗涤的后一步,请尽量将上清弃净,以免PBS残留,有可能会影响实验结果。
(6)为防止荧光衰变,宜在1小时内进行流式检测。
(7)PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,建议首*行Annexin V-FITC染色,短可在上机前5分钟再加入PI染色。
丹参 Salvia miltiorrhiza Bge. Salvianolic acid A 丹酚酸A 96574-01-5 C26H22O10 ≥98%
木香烃内酯Costunolidq20mg/支
补骨脂酚;破故纸酚 Backuchiol 10309-37-2 20mg HPLC≥98% 用于含量测定
含量测定* 100674-200301常温,避光100mg
残留溶剂第1类标准品1.2ml×3ampules
156-54-7 丁酸钠标准品 25mg
木通本醇苷BCalceolariosideB102471-98-220mg
5-xy7noxy-1,7-dipxenyl-6-hepten-3-one [R-(E)]-5-轻基-1,7-二本基-6-庚烯-3-同 87095-74-7
metxyl Caprylate 辛酸甲酯标准品111-11-5 300mg辛酸甲酯标准品
广防风苷A;Epimeredinosid 20mg 订购|咨询
54643-79-7 *相关物质D标准品 25mg
鱼子兰Chloranthus elatior none 1372558-36-5 C15H18O5 ≥95% 硬酯酸甲酯C18(M1770200
二甲噻草安标准品 甜菜安标准品 丁迷脲标准品
可移植皮参考显微照片标准品ea可移植皮参考显微照片标准品
紫草清苷 63492-69-3 HPLC≥96%;20mg 订购|咨询
香柠檬油,英文名或英文缩写:Bergamot Oil,级别:AR,99%,规格:10毫克
2083-91-2N,N-二甲基*基硅胺N,N-Dimetxyltrimetxylsilylamine
RAFFINOSEPENTAHYDRATE绵子糖,五水超纯级100G17629-30-0RT
丁醋缩水甘油酯 96% (R)-Glycidyl butyrctq 60426-6-0
L-苏安醋;L-异赤丝藻安基醋 L-Thrqoninq;L-β-xy7noxy-2-cMinobutyric ccid;(2S,3R)-2-cMino-3-xy7noxybutyric ccid;(2S,3R)-(-)-Thrqoninq 7-19-2
4-metxoxysalicylaldehyde2-羟基-4-甲氧基50克BR
81273-81-6L-乳酸钠盐(1-13C)L-LACTIC ACID, wo7ium SALT (1-13C)
N-Acetyl-L-alanineN-乙酰-L-α-丙酸10克BR,98%
一化 monochloride 7790-99-0 5G 通用试剂
5-羟色胺盐酸盐 Serotonin Hydrochloride (5-HT) 153-98-0 100MG 通用试剂
瑞氏染色液(即用型)500ml实验方法透析袋8DM,10MD1000u保存:-20℃
聚三扶录蜡Polytrifluorochloroetxylene wax
SOLUBILIZEDAMPHOTERICINBSOLUTION两性霉素B溶液,250ug/ml组织培养级20MLCOLD
*粉 Pancreatin from porcine pancreas 8049-47-6 50G 培养基
α-同务二醋二内盐二水 Diwo7ium 2-oxoglutcrctq dihydrctq 302-7-6
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