鞭毛染色试剂盒50ml使用说明书使用注意事项
1.微量试剂取用前请离心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿*、戴手套等。
4.本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不*用于检测组织样本。
鞭毛染色试剂盒50ml使用说明书操作方法
1.悬浮细胞离心(2000rpm离心5min)收集;贴壁细胞用*消化收集用PBS洗涤细胞二次(2000rpm离心5min)收集1~5×105细胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混匀;室温、避光、反应5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞;
4.请在1 hour内,进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A.荧光显微镜观察
1.滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上,并用盖玻片盖上细胞;
2.对于贴壁细胞来说,也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡;
(1)将细胞于盖玻片上生长,用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡,并设立阴性对照组;
(2)用PBS洗涤细胞两次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混匀;
(4)将上述溶液滴加于盖玻片表面,使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖;
(5)避光、室温反应5 min。
3.将盖玻片倒置于载玻片上,于荧光显微镜下观察激发波长546nm,发射波长647 nm,7-AAD荧光信号呈红色。
B.流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测,激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
鞭毛染色试剂盒50ml使用说明书实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的*消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2%的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的*消化时,注意必须*清除EDTA:在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤,清除EDTA,以免残余的EDTA与Ca2+螯合,影响Annexin V的结合。
(1)用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer;
(2)细胞收集。悬浮细胞收集:离心5分钟;贴壁细胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化时间不宜过长,否则会影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合),于室温2000rpm离心5~10分钟,收集细胞;
(3)细胞洗涤:用预冷1×PBS(4℃)重悬细胞一次,2000rpm离心5~10分钟,洗涤细胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞;
(5)Annexin V-FITC标记:加入5μL的Annexin V-FITC混匀后,避光,室温孵育15分钟;
(6)PI标记:上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
(7)上机前,补加200μL的1×Binding Buffer。
H4-IIE(大鼠肝癌细胞 ) 5×106cells/瓶×2
CM-H018人成纤维细胞*培养基100mL
IL7R Others Rat 大鼠 IL7R / IL7RA 人细胞裂解液 (阳性对照)
HT-29细胞,人结肠腺癌细胞 人黑色素瘤细胞,HME7细胞 SV40T转化人脐静脉内皮细胞;PUMC-HUVEC-T1
人胚肺二倍体细胞;HEL-2
CD86 Others Human 人 CD86 / B7-2 人细胞裂解液 (阳性对照)
CM-M125小鼠牙细胞*培养基100mL
IGSF8 Others Mouse 小鼠 PGRL / IGSF8 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠肾实质细胞*培养基 100mL
P19小鼠畸胎瘤细胞 P19 mouse teratoma cells a-MEM(肌醇 43.2mg/l,* 8.82mg/l)+7.5%BCS+2.5%FBS
IL12A Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 / 恒河猴 IL12A / NKSF1 蛋白 (Fc 标签)
SW 1990(人胰腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 NCL-H460(非小细胞肺癌)
SDF2 Others Mouse 小鼠 SDF2 / SDF-2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
人膀胱平滑肌细胞裂解物HBdSMCL
小鼠骨髓瘤细胞;Fox-NY
SK-OV-3细胞,卵巢癌细胞 人胃癌细胞系,HS-746T细胞 豹猫肌肉成纤维样细胞;LCM4
tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);F9-CAG-tTA-4D6
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/turkey/Turkey/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠甲羟戊酸5-焦磷酸脱羧酶(MDD)ELISA试剂盒 ,英文名: MDD ELISA Kit
人血管生成素1(ANG-1)ELISA检测试剂盒HumanAngiopoietin1,ANG-1ELISAKit 96T/48T
猪戊型肝炎病毒(HEV)核酸检测试剂盒(RT-PCR法) 48T
MVIgG麻疹病毒IgG(间接法二步法)
体液超氧化物阴离子荧光法定量检测试剂盒20次
ELISAKitCXCR1人CXC趋化因子受体1规格:48T/96T
小鼠多巴胺D1受体(D1R)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Rat visceral adipose specific serine protease inhibitor (vaspin) ELISA Kit 大鼠内脏脂肪特异性*蛋白酶抑制剂(vaspin)ELISA试剂盒
Humanvasopeptidaseinhibitors,VPIELISAKit 人血管活性肽酶抑制剂(VPI)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanAquaporin2,AQP-2ELISA试剂盒人水通道蛋白2(AQP-2)ELISA试剂盒规格:96T/48T
植物乙酰辅酶A*乙酰转移酶(ACAT)活性荧光定量检测试剂盒20次
HumanTissuefactorpathwayinhibitor,TFPIELISAKit人组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA试剂盒规格:96T/48T
鞭毛染色试剂盒50ml使用说明书兔子白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
兔子白介素10(IL-10)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
兔子白介素1(IL-1)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
兔子γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装