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过氧化物酶染色试剂盒15ml售后服务实验操作步骤:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量为 1mL ,其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推;对于细胞悬液每50~100 万细胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取适量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超纯水的比例稀释JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色缓冲液(5 ×),混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、阳性对照的设置:
把试剂盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到细胞培养液中,稀释至10uM ,处理细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ,进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞,通常10uM CCCP处理 20 分钟后线粒体的膜电位会*丧失,JC-1 染色后观察应呈绿色荧光;而正常的细胞经JC-1 染色后应显示红色荧光。对于特定的细胞,CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同,需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞:
(1)取 10~60 万细胞,重悬于 0.5mL 细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中 37 ℃孵育20 分钟。
(3)在孵育期间,按照每 1mL JC-1 染色缓冲液(5×)加入 4mL 蒸馏水的比例,配制适量的JC-1 染色缓冲液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育结束后,600g 4 ℃离心3 ~4 分钟,沉淀细胞。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。
(5)用JC-1 染色缓冲液(1×)洗涤 2 次:加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。再加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心 3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。
(6)再用适量 JC-1 染色缓冲液(1×)重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
过氧化物酶染色试剂盒15ml售后服务注意事项
(1)本试剂只适用于实验,不适用于临床检测;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙锭)有毒性,能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用,使用时需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。在处理和标记时,尽可能在暗处进行。在孵育阶段,用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后,在暗室内用显微镜观察;
(4)整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作,以免影响细胞状态。
(5)在细胞洗涤的后一步,请尽量将上清弃净,以免PBS残留,有可能会影响实验结果。
(6)为防止荧光衰变,宜在1小时内进行流式检测。
(7)PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,建议首*行Annexin V-FITC染色,短可在上机前5分钟再加入PI染色。
HBL-100(人整合SV40基因的上皮细胞) 5×106cells/瓶×2
CM-H009人支气管上皮细胞*培养基100mL
CSF2 Others Rat 大鼠 GM-CSF / CSF2 人细胞裂解液 (阳性对照)
SW480细胞,人结肠癌细胞 人黑色素瘤细胞,MV3细胞 EB病毒转化的人B淋巴细胞;Mao
人淋巴细胞;1301
AZU1 Others Human 人 AZU1 / Azurocidin 1 / HBP 人细胞裂解液 (阳性对照)
人EB病毒转化的B细胞;CGM1
IGSF3 Others Human 人 IGSF3 / EWI-3 人细胞裂解液 (阳性对照)
NCI-H1395 人肺腺癌细胞
Raw264.7, 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞
LGALS1 Protein Human 重组人 Galectin-1 / LGALS1 蛋白
人肝细胞;QSG-7701 [QSG7701] 人呼吸道上皮细胞*培养基 100mL
CSF1R Others Rat 大鼠 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 人细胞裂解液 (阳性对照)
人膀胱上皮永生化细胞;SV-HUC-1
CM-H050人胎盘羊膜细胞*培养基100mL
Colo320DM细胞,人结肠癌细胞 胎儿骨髓间充质细胞,FBM细胞 人永生化淋巴细胞;CNLMG-B5537LC
FRhK-4(恒河猴胚肾细胞) 5×106cells/瓶×2
BCAM Others Human 人 BCAM 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人血管内皮抑素抗体(ES-Ab)免疫试剂盒 Human anti-Endostatin antibody,ES-Ab ELISA Kit
人抗纺锤体抗体(MSA)ELISA试剂盒 ,英文名: MSA ELISA Kit
RatInterleukin27,IL-27ELISA试剂盒大鼠白介素27(IL-27)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanGlutamatedehydrogenase;GDH/GLDHELISA试剂盒人*脱氢酶(GDH/GLDH)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Humanintrinsicfactorantibody,IFAELISAKit人抗内因子抗体(IFA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
小鼠端粒酶(TE)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Rat brain gut peptide (BGP/Gehrelin) ELISA Kit 大鼠脑肠肽(BGP/Gehrelin)ELISA试剂盒
Humanplaet-associatedimmunoglobulins,PAIgELISAKit 人血小板相关免疫球蛋白(PAIg)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanAquaporin5,AQP-5ELISA试剂盒人水通道蛋白5(AQP-5)ELISA试剂盒规格:96T/48T
植物游离氨基酸含量比色法定量检测试剂盒20次
HumanThyroid-Peroxidase,TPOELISAKit人甲状腺过氧化物酶(TPO)ELISA试剂盒规格:96T/48T
过氧化物酶染色试剂盒15ml售后服务兔子Ⅲ型胶原(ColⅢ)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
兔子Ⅱ型胶原(ColⅡ)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
兔子Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
兔子Ⅰ型胶原(ColⅠ)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装