鞭毛染色试剂盒10ml免费代测使用注意事项
1．微量试剂取用前请离心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿*、戴手套等。
4．本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不*用于检测组织样本。
鞭毛染色试剂盒10ml免费代测操作方法
1．悬浮细胞离心（2000rpm离心5min）收集；贴壁细胞用*消化收集用PBS洗涤细胞二次（2000rpm离心5min）收集1~5×105细胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混匀；室温、避光、反应5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞；
4．请在1 hour内，进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A．荧光显微镜观察
1．滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上，并用盖玻片盖上细胞；
2．对于贴壁细胞来说，也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡；
（1）将细胞于盖玻片上生长，用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡，并设立阴性对照组；
（2）用PBS洗涤细胞两次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混匀；
（4）将上述溶液滴加于盖玻片表面，使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖；
（5）避光、室温反应5 min。
3．将盖玻片倒置于载玻片上，于荧光显微镜下观察激发波长546nm，发射波长647 nm，7-AAD荧光信号呈红色。
B．流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测，激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
鞭毛染色试剂盒10ml免费代测实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的*消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2％的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的*消化时，注意必须*清除EDTA：在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤，清除EDTA，以免残余的EDTA与Ca2＋螯合，影响Annexin V的结合。
（1）用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer；
（2）细胞收集。悬浮细胞收集：离心5分钟；贴壁细胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化时间不宜过长，否则会影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合），于室温2000rpm离心5～10分钟，收集细胞；
（3）细胞洗涤：用预冷1×PBS（4℃）重悬细胞一次，2000rpm离心5～10分钟，洗涤细胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞；
（5）Annexin V-FITC标记：加入5μL的Annexin V-FITC混匀后，避光，室温孵育15分钟；
（6）PI标记：上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
（7）上机前，补加200μL的1×Binding Buffer。
H9c2(2-1) (大鼠心肌细胞) 5×106cells/瓶×2
CM-H025人胰腺上皮细胞*培养基100mL
SELE Others Rat 大鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 人细胞裂解液 (阳性对照)
HuTu-80细胞，人十二指肠腺癌细胞 人黑色素瘤细胞,HME2细胞 人肝永生化细胞;THLE-3
人类成纤维细胞系;CNLMG-B5537SKIN
CD80 Others Human 人 B7-1 / CD80 人细胞裂解液 (阳性对照)
人肺成纤维细胞RNAHPF miRNA5 μg
IGSF8 Others Human 人 PGRL / IGSF8 人细胞裂解液 (阳性对照)
小香猪皮肤细胞;SSC-S2
LS174T细胞，人结直肠腺癌细胞 人眼脉络黑色素瘤细胞,MuM-2C细胞 人胰腺腺泡上皮癌;HPAC
HFL1(人肺成纤维细胞) 5×106cells/瓶×2
TNFRSF9 Others Human 人 4-1BB / CD137 / TNFRSF9 人细胞裂解液 (阳性对照)
IFNA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 人细胞裂解液 (阳性对照)
人膀胱平滑肌细胞总RNAHBdSMC tRNA
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-DUKXB11-TGF-β Dinding Protein cDNA
AR42J细胞，人胰腺细胞 人皮肤成纤维细胞系,BJ细胞 小鼠神经母细胞瘤细胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]
HT-29(人结肠癌细胞) 5×106cells/瓶×2
Gibco 17105041 *Dispase II, powder 5 g
大鼠肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF-6)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人血管生长素(ANG)免疫试剂盒 Human Angiogenin,ANG ELISA Kit
人抗肺泡基底膜抗体(ABM-Ab)ELISA试剂盒 ，英文名： ABM-Ab ELISA Kit
RatInterleukin23,IL-23ELISA试剂盒大鼠白介素23(IL-23)ELISA试剂盒规格：96T/48T
Humanglucose-6-phosphateisomerase,GPIELISA试剂盒人葡萄糖6磷酸异构酶(GPI)ELISA试剂盒规格：96T/48T
HumanIntestinaltrefoilfactor,ITFELISAKit人肠三叶因子(ITF)ELISA试剂盒规格：96T/48T
小鼠多巴胺(DA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Rat visfatin / visfatin (visfatin) ELISA Kit 大鼠内脂素/内脏脂肪素(visfatin)ELISA试剂盒
HumanThromboxaneA2,TX-A2ELISAKit 人血栓素A2(TX-A2)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanAquaporin3,AQP-3ELISA试剂盒人水通道蛋白3(AQP-3)ELISA试剂盒规格：96T/48T
植物乙酰辅酶A羧化酶(ACETYL-COACARBOXYLASE)活性比色法定量检测试剂盒20次
HumanThyroxine-BindingGlobulinAssay,TBGELISAKit人甲状腺结合球蛋白(TBG)ELISA试剂盒规格：96T/48T
鞭毛染色试剂盒10ml免费代测兔子α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
兔子TH糖蛋白(THP)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
兔子S100蛋白(S-100)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
兔子S100B蛋白(S-100B)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
