产品介绍:
XTT(二甲氧唑黄)是一种类似于MTT 的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,活细胞线粒体中存在与辅酶Ⅱ相关的脱氢酶,可将黄色的XTT 还原成水溶性的橘黄色的甲臜。生成的甲月赞能够溶解在组织培养基中,不形成颗粒,可直接用酶联免疫检测仪检测定吸光值。 操作方法 1. 96 孔板加入细胞100μL/孔(约1×104),置37℃ 5%CO2 细胞培养箱培养24 小时。2.加入适当浓度的受试化合物。3.将96 孔板在37℃,含5% CO2 空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。 4. 向各孔中加入50 μl 的XTT 检测工作液。 5. 37℃下孵育1~4 小时。 6. 酶标仪在450nm 波长处检测每孔的光密度。 结果分析 1. 细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加XTT 工作液,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加XTT 工作液,无细胞),各重复孔的OD 值取均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100 2. 求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。 |
产品属性:
产品名称 | 英文名称 | 产品规格 | 产品货号 |
XTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Kit | 500T|1000T | FS-X9588 |
注意事项:
1、本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
2、螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
3、禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
4、样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5、最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并*清除残留清洁剂。
6、避免皮肤或粘膜与试剂接触。
7、需长时间保存可-20℃避光保存。避免反复冻融,否则将会增加空白吸收,从而影响检测结果。最好小剂量分装,用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光。
8、用培养基或 PBS 来配制待检测药物。如果待测药物有还原性,则测定不含细胞,仅含有 MTS 的待测药物溶液在 490 nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小,则可以直接加入 MTS ,如果吸光度相对较大,则需要除去培养基,并用新鲜培养基洗涤细胞两次,然后加入新的 100 μl 培养基和 10 μl MTS 进行检测。
9、细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
10、加 MTS 溶液后孵育时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定,对于大多数情况孵育 1 小时即可,白细胞需要培养较长时间。
11、如果不是使用 96 孔板检测,MTS 溶液的用量相应等比例增加即可。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
β内啡肽受体(β-EPR)elisa检测试剂盒 英文名称:β-EPR ELISA Kit,β-EPR,
白蛋白(ALB)elisa检测试剂盒 英文名称:ALB ELISA Kit,ALB,
α乳清蛋白(α-La)elisa检测试剂盒 英文名称:α-La ELISA Kit,α-La,
T细胞活化连接蛋白(LAT)elisa检测试剂盒 英文名称:LAT ELISA Kit,LAT,
RNA结合蛋白FUS(FUS/TLS)elisa检测试剂盒 英文名称:FUS/TLS ELISA Kit,FUS/TLS,
Lben丙氨suan解氨mei(PAL)elisa检测试剂盒 英文名称:PAL ELISA Kit,PAL,
C型凝集su结构域家族4成员E(CLEC4E)elisa检测试剂盒 英文名称:CLEC4E ELISA Kit,CLEC4E,
CC趋化因子7(CCL7/MCP3/SCYA6/SCYA7)elisa检测试剂盒 英文名称:CCL7/MCP3/SCYA6/SCYA7 ELISA Kit,CCL7/MCP3/SCYA6/SCYA7,
Ⅳ型前胶原氨基末端肽(PⅣNP)elisa检测试剂盒 英文名称:PⅣNP ELISA Kit,PⅣNP,
5羟乙suan(5-HIAA)elisa检测试剂盒 英文名称:5-HIAA ELISA Kit,5-HIAA,
基膜聚糖/内腔蛋白(LUM)elisa检测试剂盒 英文名称:LUM ELISA Kit,LUM,
过氧化氢mei(CAT)elisa检测试剂盒 英文名称:CAT ELISA Kit,CAT,
花生四烯suan15脂加氧mei(ALOX15/LOG15)elisa检测试剂盒 英文名称:ALOX15/LOG15 ELISA Kit,ALOX15/LOG15,
骨成型蛋白2(BMP-2)elisa检测试剂盒 英文名称:BMP-2 ELISA Kit,BMP-2,
高半胱氨suan(Hcy)elisa检测试剂盒 英文名称:Hcy ELISA Kit,Hcy,
钙调磷suanmei(CaN)elisa检测试剂盒 英文名称:CaN ELISA Kit,CaN,
肺表面活性蛋白D(SP-D)elisa检测试剂盒 英文名称:SP-D ELISA Kit,SP-D,
XTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂葡jiaan标准品 规格:500mg 英文名称:Meglumine (AS)
力农相关物质A标准品 规格:100mg 英文名称:Amrinone Related Compound A
敌畏标准品 规格:150mg 英文名称:Dichlorvos (AS)
托普利标准品 规格:200mg 英文名称:Captopril
醋suan钙标准品 规格:1g 英文名称:Calcium Acetate (AS)
伊班膦suan相关物质A标准品 规格:25mg 英文名称:
lv化乙酰jia标准品 规格:500mg 英文名称:Methacholine Chloride (AS)
西酞普兰相关物质D标准品 规格:15mg 英文名称:
泮托拉zuo相关物质D和F混合物标准品 规格:20mg 英文名称:
那西丁标准品 规格:500mg 英文名称:Phenacetin