XTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒1000T实验方法使用注意事项
1．微量试剂取用前请离心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿*、戴手套等。
4．本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不*用于检测组织样本。
产品名称：XTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒1000T实验方法
储存条件： 2-8℃避光保存。*存放-20℃避光保存。
有效期：一年。
产品简介：
XTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒是应用二甲氧唑黄2,3-bis[2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl]-5-[(phenylamino)carbonyl]-2H-tetrazoliumhydroxide快速高灵敏度检测细胞增殖和细胞毒性的比色检测产品。XTT在电子耦合试剂存在的情况下能够被线粒体内的一些与辅酶Ⅱ相关的脱氢酶还原成橙黄色的水溶性的Formazan，生成的Formazan量与活细胞数量成正比。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数量呈线性关系。
XTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒1000T实验方法操作方法
1．悬浮细胞离心（2000rpm离心5min）收集；贴壁细胞用*消化收集用PBS洗涤细胞二次（2000rpm离心5min）收集1~5×105细胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混匀；室温、避光、反应5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞；
4．请在1 hour内，进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A．荧光显微镜观察
1．滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上，并用盖玻片盖上细胞；
2．对于贴壁细胞来说，也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡；
（1）将细胞于盖玻片上生长，用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡，并设立阴性对照组；
（2）用PBS洗涤细胞两次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混匀；
（4）将上述溶液滴加于盖玻片表面，使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖；
（5）避光、室温反应5 min。
3．将盖玻片倒置于载玻片上，于荧光显微镜下观察激发波长546nm，发射波长647 nm，7-AAD荧光信号呈红色。
B．流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测，激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
XTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒1000T实验方法实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的*消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2％的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的*消化时，注意必须*清除EDTA：在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤，清除EDTA，以免残余的EDTA与Ca2＋螯合，影响Annexin V的结合。
（1）用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer；
（2）细胞收集。悬浮细胞收集：离心5分钟；贴壁细胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化时间不宜过长，否则会影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合），于室温2000rpm离心5～10分钟，收集细胞；
（3）细胞洗涤：用预冷1×PBS（4℃）重悬细胞一次，2000rpm离心5～10分钟，洗涤细胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞；
（5）Annexin V-FITC标记：加入5μL的Annexin V-FITC混匀后，避光，室温孵育15分钟；
（6）PI标记：上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
（7）上机前，补加200μL的1×Binding Buffer。
国槐Sophora japonica Robinetin 洋槐黄素 490-31-3 C15H10O7 ≥96%
仙鹤草酚BcgrimopholB10mg/支
花前胡醇 Peucedanol 28095-18-3 20mg HPLC≥98% 用于含量测定
中药对照药材广天仙子121478-200401TLC法鉴别
WITHANOLIDE A 睡茄素A纯度：>95%
145781-92-6 醋酸戈舍瑞林标准品(避光)，(+4℃,+4℃) 100mg
聚炳烯醋铵酯IIPolymetxylammoniumacrylateesterII200mg
Pellitorine 墙草减 18836-52-7
Allantoin*标准品97-59-6200mg*标准品
知母皂苷BIII 142759-74-8 HPLC≥98%;10mg 订购|咨询
鼠尾草 Salvia sp. wo7ium Dahshensu 丹参素钠 67920-52-9 C9H9O5Na ≥98%
原花青速Procnthocycnidins20mg/支
茯苓酸 Pachymic acid 29070-92-6 20mg HPLC≥98% 用于含量测定
L-*100758-常温，避光30mg
Bicalutamide*标准品90357-06-5200mg
新戊二醇shēng huà shì jì容量：RT，避光5克
22644-28-6(R)-(+)-2-甲基-(R)-2-metxyl-9,4-putene7iol
盐酸乙二，英文名或英文缩写：etxylenediamine dixy7nochloride，级别：BR，规格：500克
化铅 lead fluoride 7783-46-2 25G 通用试剂
1-癸烯 1-Decene,≥97.0% 872-05-9 25ML 通用试剂
3-叔丁基-4-羟基本甲醚shēng huà shì jì容量：2～8℃100克
(*)
沙门氏志贺氏属琼脂培养基5克RT
侧金盏花醇;啊东糖醇;务五醇;福寿草醇;侧金盏(务)糖醇;核糖醇 cdonitol;Ribitol 488-81-3
4--1-酚 4-Chloro-1-naphthol (≥98%, 4CN) 604-44-4 5G 核酸衍生物
XTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒1000T实验方法Ammoniumfluotitanate六扶钛(IV)酸100克AR，90%
5350-41-4苄基*基*;三*BenzyltrimetxylaMMoniuM broMide;TrimetxylbenzylaMMoniuM broMide
Pentaerythritol四羟甲基烷100克AR，97%
乙基化 Ethyl Chloride 2386-64-3 100ML 通用试剂
L-色酸 L-Tryptophan (cell culture tested, ≥9... 73-22-3 25G 基
