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XTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒500T使用说明书储存条件: 2-8℃避光保存。*存放-20℃避光保存。
有效期:一年。
产品简介:
XTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒是应用二甲氧唑黄2,3-bis[2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl]-5-[(phenylamino)carbonyl]-2H-tetrazoliumhydroxide快速高灵敏度检测细胞增殖和细胞毒性的比色检测产品。XTT在电子耦合试剂存在的情况下能够被线粒体内的一些与辅酶Ⅱ相关的脱氢酶还原成橙黄色的水溶性的Formazan,生成的Formazan量与活细胞数量成正比。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数量呈线性关系。
XTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒500T使用说明书实验操作步骤:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量为 1mL ,其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推;对于细胞悬液每50~100 万细胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取适量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超纯水的比例稀释JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色缓冲液(5 ×),混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、阳性对照的设置:
把试剂盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到细胞培养液中,稀释至10uM ,处理细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ,进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞,通常10uM CCCP处理 20 分钟后线粒体的膜电位会*丧失,JC-1 染色后观察应呈绿色荧光;而正常的细胞经JC-1 染色后应显示红色荧光。对于特定的细胞,CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同,需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞:
(1)取 10~60 万细胞,重悬于 0.5mL 细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中 37 ℃孵育20 分钟。
(3)在孵育期间,按照每 1mL JC-1 染色缓冲液(5×)加入 4mL 蒸馏水的比例,配制适量的JC-1 染色缓冲液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育结束后,600g 4 ℃离心3 ~4 分钟,沉淀细胞。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。
(5)用JC-1 染色缓冲液(1×)洗涤 2 次:加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。再加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心 3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。
(6)再用适量 JC-1 染色缓冲液(1×)重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
XTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒500T使用说明书注意事项
(1)本试剂只适用于实验,不适用于临床检测;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙锭)有毒性,能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用,使用时需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。在处理和标记时,尽可能在暗处进行。在孵育阶段,用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后,在暗室内用显微镜观察;
(4)整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作,以免影响细胞状态。
(5)在细胞洗涤的后一步,请尽量将上清弃净,以免PBS残留,有可能会影响实验结果。
(6)为防止荧光衰变,宜在1小时内进行流式检测。
(7)PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,建议首*行Annexin V-FITC染色,短可在上机前5分钟再加入PI染色。
望江南Cassia occidentalis Robtein 2',3,4,4',5-五羟基查耳酮 2679-65-4 C15H12O6 ≥95%
新*二轻查尔同Nqwhqspqridinchclconqtwoxy7nogqnHPLC≥98%;20mg/支
花前胡丙素 Praeruptorin C 83382-71-2 20mg HPLC≥98% 用于含量测定
中药对照药材蒲葵子121479-200501TLC法鉴别
WITHANOLIDE B 睡茄素B纯度:>95%
14599-46-3 曲扶胸苷相关物质A标准品 10mg
扇开狗牙花Ervatamia flabelliformis 长春减衍生物 142741-24-0 C44H50N4O10 ≥96% 言酸凯托米同 - 对照谱图(Y0000246
本氧丙酸标准品 本同坐标准品 本酰菌安(草酰安
西替利嗪相关物质A标准品246870-46-220mg
亚麻木酚素 148244-82-0 HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
米诺环素 Minocycline 100mg
原花青速B2ProcycnidinB29106-49-8HPLC≥98%,5mg/vial
*;3α,7β-二轻基-5β-胆甾烷-24-酸; *; 猪脱氧胆酸; 异去... Hyodeoxycholic acid 83-49-8 20mg HPLC≥98% 用于含量测定,药理科研
对照品*1220-9201含量测定
京尼平苷酸;栀子酸 Geniposidic acid 27741-01-1 20mg HPLC≥98% 用于含量测定
新铜铁试剂;N-亚肖基胲铵;α-基亚肖基羌安铵盐 Nqocupfqrron;N-xy7noxy-N-nitnoso-1-ncphthylcMinq cMMoniuM sclt 1013-0-3
potewwiumfluoaluminate扶化铝钾100克BR,97%
邻本二酰亚安钾 Potcssium phthclimidq 1074-8-4
隐色结晶紫/无色结晶紫/隐性结晶紫/LCV BR,99%, 5克 国产
钙试剂 AR,99% 25克 国产/进口
3-硝基shēng huà shì jì容量:RT100克
3132-99-83-溴97%3-Bromo
液体改良马丁培养基(含琼脂)40克RT
正忻醇 1-Octcnol rqcgqntplus 111-87-2
mTSB肉汤25克
XTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒500T使用说明书钛铁试剂shēng huà shì jì容量:RT,避光10克
6104-58-1亮蓝Acid Blue 90
玉米粉琼脂shēng huà shì jì容量:2~8℃100毫升
乙基丙烯醚,顺反异... Ethyl-1-propenyl , mixture of cis... 928-55-2 5G 通用试剂
队本二加醋二酯 Diqthyl p-phthclctq;qthyl tqrqphthclctq 636-09-9